[发明专利]PSA的分析方法、以及使用上述分析方法的前列腺癌和前列腺肥大症的鉴别方法

说明书

技术领域

本发明涉及PSA的分析方法、使用该PSA分析方法的前列腺癌和前列腺肥大症的鉴别方法、以及PSA的分析试剂盒。根据本发明，通过使用与由前列腺癌的癌细胞分泌的PSA特异性表达的糖链结合的凝集素，可以切实地鉴别前列腺癌和前列腺肥大症。

背景技术

前列腺癌主要是60岁以上的男性发病，在欧美各国，男性的癌症中，是仅次于肺癌的死亡原因。前列腺癌的发生率在1975年以后增加，其原因之一为，利用前列腺特异抗原(Prostate Specific Antigen，以下称为PSA)的诊断方法的普及。通过该PSA的测定，利用以往的直肠指检难以发现的早期癌症得以发现。

PSA为由前列腺的腺细胞分泌到前列腺的腺腔内的蛋白质，是前列腺特异性地表达的蛋白质，而不是前列腺癌特异性地表达的蛋白质。因此已知在前列腺癌以外的前列腺肥大症和前列腺炎等疾病中也升高。

现在，广泛使用的PSA测定法为对与α1-抗糜蛋白酶（antichymotrypsin）结合的结合型PSA(以下有时称为PSA-ACT)和游离型PSA(以下有时称为游离PSA)进行测定的总PSA测定法，总PSA的测定值为10ng/mL以上时，50%以上的人发现前列腺癌，4～10ng/mL的人中，25%的人发现前列腺癌，2～4ng/mL的人中，15%的人发现前列腺癌。特别是将总PSA值为4～10ng/mL的区域称为灰区(gray zone)，但是在前列腺肥大症的患者中，表现出该灰区的总PSA值的患者多，期待开发可以鉴别前列腺癌和前列腺肥大症的患者的PSA的分析方法。

对于表现出上述灰区的总PSA值的患者，为了鉴别前列腺肥大症和前列腺癌，对游离PSA与总PSA的比率进行测定。有报告指出，前列腺癌患者中，游离PSA相对于总PSA的比率减少，若通过仅测定游离型PSA的游离PSA的测定法来测定游离PSA值，求出游离PSA值与总PSA值的比(以下有时称为“游离PSA/总PSA比”)，则该值为25%以下时，前列腺癌的可能性高。但是在灰区的检样中，上述游离PSA/总PSA比为0～10%范围时，前列腺癌的可能性为56%，10～15%时为28%，15～20%时为20%，20～25%时为16%，即使使用游离PSA/总PSA比，也不容易鉴别前列腺癌和前列腺肥大症。

对于总PSA为10ng/mL以上的患者和总PSA为4～10ng/mL的灰区、且游离PSA/总PSA比为25%以下的患者的情况，为了对前列腺癌进行确诊，进行前列腺的活体组织检查。但是，特别是后者中，发现前列腺癌的比率为30%左右，患者承受过度的负担，从该观点考虑，要求开发简便地鉴别前列腺癌和前列腺肥大症的方法。

已知PSA为具有1根天冬酰胺结合型糖链(以下有时称为N-聚糖链)的糖蛋白质，而前列腺癌患者的PSA具有高分支化复合型糖链，此外认为前列腺癌的患者具有特异性的糖链。例如有报告指出，对由来源于前列腺癌的LNCaP细胞分泌的PSA的N-聚糖链用质量分析仪进行分析后可知，与正常精浆中的PSA相比，N-乙酰己糖胺(HexNAc)和岩藻糖的含量多，唾液酸欠缺(非专利文献1)。但是该LNCaP细胞的PSA的糖链由于唾液酸欠缺等，与生物体内的前列腺癌患者的血清中的PSA的糖链不同，认为为特殊的PSA。

此外，大山等人在精浆中的PSA的N-聚糖链中发现唾液酸α(2,3)半乳糖残基(Sialic acid alpha 2,3 Gal-R)，有报告指出，与前列腺肥大症的患者相比，前列腺癌的患者的PSA中，该唾液酸α(2,3)半乳糖残基多(专利文献1和非专利文献2)。从而发现，使与上述唾液酸α(2,3)半乳糖残基特异性地结合的怀槐凝集素(M.amurensis agglutinin，以下有时称为MAA)与前列腺癌患者的PSA结合，测定与MAA结合的游离PSA的比率，由此可以鉴别前列腺癌和前列腺肥大症(专利文献1和非专利文献2)。但是上述唾液酸α(2,3)半乳糖残基，除了PSA之外，在α1-抗糜蛋白酶中也有发现，因此MAA对于α1-抗糜蛋白酶也具有亲和性，因此α1-抗糜蛋白酶与PSA结合的情况下，即PSA-ACT的情况下，不能将具有唾液酸α(2,3)半乳糖残基的PSA与不具有唾液酸α(2,3)半乳糖残基的PSA分离。因此，利用总PSA的测定法时，不能鉴别前列腺癌患者和前列腺肥大症患者，有必要测定游离PSA。