[发明专利]复合物和生产过程

权利要求书

1.用于生产生物活性复合物的方法，所述方法包含使带有α-乳清蛋白的序列或其片段但缺少分子内二硫键的重组蛋白在形成生物活性复合物的条件下与油酸接触并隔离该复合物。

2.根据权利要求1所述的方法，其中该重组蛋白包含α-乳清蛋白，在该α-乳清蛋白中所有半胱氨酸残基被改变为其他氨基酸。

3.根据权利要求2所述的方法，其中该α-乳清蛋白中的半胱氨酸残基被改变为丙氨酸残基。

4.根据前述权利要求中任一项权利要求所述的方法，其中该α-乳清蛋白是人α-乳清蛋白。

5.根据前述权利要求中任一项权利要求所述的方法，其中带有在权利要求1中所限定的α-乳清蛋白序列或其片段的重组蛋白与油酸在离子交换柱特别是阴离子交换柱上接触。

6.根据权利要求5所述的方法，其中用线性盐梯度将该柱进行洗脱，并使生物活性复合物从在高盐浓度下洗脱的单一组分隔离出来。

7.根据权利要求6所述的方法，其中该高盐浓度是1M的NaCl或对等物。

8.根据前述权利要求中任一项权利要求所述的方法，其中该重组蛋白包含SEQ IDNO.1

KQFTKAELSQLLKDIDGYGGIALPELIATMFHTSGYDTQAIVENNESTEYGLFQISNKLWAKSSQVPQSRNIADISADKFLDDDITDDIMAAKKILDIKGIDYWLAHKALATEKLEQWLAEKL(SEQ ID NO 1)，

可选地有多达20个氨基酸附在该蛋白质的末端。

9.根据权利要求8所述的方法，其中该重组蛋白为SEQ ID No 2

MKQFTKAELSQLLKDIDGYGGIALPELIATMFHTSGYDTQAIVENNESTEYGLFQISNKLWAKSSQVPQSRNIADISADKFLDDDITDDIMAAKKILDIKGIDYWLAHKALATEKLEQWLAEKL  (SEQ ID NO 2)。

10.生物活性复合物，包含带有α-乳清蛋白的序列但缺少分子内二硫键的重组蛋白，或其片段，和油酸。

11.根据权利要求10所述的生物活性复合物，其中该重组蛋白是SEQ ID NO 1或SEQ ID NO 2。

12.药物组合物，包含根据权利要求10或权利要求11所述的复合物与药学上可接受的载体结合。

13.根据权利要求10或权利要求11所述的生物活性复合物，其用于治疗。

14.根据权利要求13所述的生物活性复合物，其用于治疗癌症。

15.提高生物活性复合物的产量的方法，该生物活性复合物可通过包含在离子交换条件下使α-乳清蛋白或其片段与油酸接触的过程而得，所述方法在所述过程中包含使用带有α-乳清蛋白的该序列或其片段但缺少至少一些分子内二硫键的重组蛋白。

16.根据权利要求16所述的方法，其中至少一些半胱氨酸残基被改变为不同的氨基酸。

17.带有α-乳清蛋白的该序列或其片段但缺少分子内二硫键的重组蛋白的使用，例如在该使用中，半胱氨酸残基特别是所有半胱氨酸残基在生物活性复合物的制备中被改变为不同的氨基酸。