[发明专利]用于甘油三酯合成途径的基于细胞的测定

权利要求书

1.一种用于鉴定抑制酰基辅酶A:二酰基甘油酰基转移酶(DGAT)活性的化合物的方法，其包括如下步骤：

a.在所述化合物存在和不存在的情况下，使稳定同位素标记的脂肪酸与细胞接触；

b.用异丙醇提取所述细胞；

c.在所述化合物存在的情况下，测定稳定同位素标记的甘油三酯水平；和

d.在所述化合物不存在的情况下，测定稳定同位素标记的甘油三酯水平；

由此，稳定同位素标记的甘油三酯水平的变化表明所述化合物抑制DGAT活性。

2.权利要求1的方法，其中所述稳定同位素为¹³C。

3.权利要求1的方法，其中所述稳定同位素标记的脂肪酸为¹³C₁₈-油酸。

4.权利要求1的方法，其中所述稳定同位素标记的甘油三酯通过液相层析-质谱分光光度计系统检测。

5.一种测定参与甘油三酯合成的酶的活性的方法，其包括如下步骤：

a.使稳定同位素标记的脂肪酸与细胞接触；

b.用异丙醇提取所述细胞；和

c.检测稳定同位素标记的溶血磷脂酸、磷脂酸或二酰基甘油或甘油三酯的存在情况。

6.权利要求5的方法，其中所述酶为酰基辅酶A:二酰基甘油酰基转移酶(DGAT)。

7.权利要求5的方法，其中所述酶为甘油-3-磷酸酰基转移酶(GPAT)。

8.权利要求5的方法，其中所述酶为1-酰基甘油-3-磷酸-O-酰基转移酶(AGPAT)。

9.权利要求5的方法，其中所述酶为磷脂酸磷酸酶(PAP)。

10.权利要求5的方法，其中所述稳定同位素为¹³C。

11.权利要求5的方法，其中所述稳定同位素标记的脂肪酸为¹³C₁₈-油酸。