[发明专利]核酸定量的方法

权利要求书

1.用于相对定量样品中至少一种靶核酸的方法，其包括以下步骤：

(a) 包含在样品中的至少一种靶核酸中的每一种的扩增和同时获得与至少一种靶核酸中的每一种的扩增相关的信号，

(b) 对比用核酸的至少一种样品中的每一种的扩增和同时获得与至少一种对比用核酸中的每一种的扩增相关的信号，

(c) 获得的信号对背景信号做修正，

(d) 靶和对比用核酸的每一个扩增循环的循环到循环扩增效率ê(C)的计算，

(e) 靶和对比用核酸的循环到循环扩增效率ê(C)的随机性的量度M的计算，

(f) 循环数C_M的确定，其中M对于靶和对比用核酸是最小的，

(g) 从C_M值中计算特征性循环数C_C，

(h) 通过比较靶和对比用样品的C_C，与对比用核酸相比，确定样品中至少一种靶核酸中的每一种的相对量。

2.用于绝对定量样品中至少一种靶核酸的方法，其包括以下步骤：

(a) 包含在样品中的至少一种靶核酸中的每一种的扩增和同时获得与至少一种靶核酸中的每一种的扩增相关的信号，

(b) 已知浓度的核酸标准品稀释系列的样品的扩增和同时获得与标准样品中的核酸的扩增相关的信号，

(c) 获得的信号对背景信号做修正，

(d) 靶和标准样品的每一个扩增循环的循环到循环扩增效率ê(C)的计算，

(e) 靶和标准样品的循环到循环扩增效率ê(C)的随机性的量度M的计算，

(f) 循环数C_M的确定，其中M对于靶和标准样品是最小的，

(g) 从C_M值中计算特征性循环数C_C，

(h) 通过比较靶和标准样品的C_C确定样品中至少一种靶核酸中的每一种的初始量。

3.用于确定样品中至少一种靶核酸的Ct值的方法，其包括以下步骤：

(a) 包含在样品中的至少一种靶核酸中的每一种的扩增，

(b) 同时获得关联于至少一种靶核酸中的每一种的扩增的信号，

(c) 获得的信号对背景信号做修正，

(d) 每一种靶核酸的每一个扩增循环的循环到循环扩增效率ê(C)的计算，

(e) 每一种靶核酸的循环到循环扩增效率ê(C)的随机性的量度M的计算，

(f) 循环数C_M的确定，其中M对于每一种靶核酸是最小的，

(g) 从C_M值中计算特征性循环数C_C，

(h) 从C_C值中计算Ct值。

4.用于相对定量样品中至少一种靶核酸的方法，其包括以下步骤：

(a) 获得的用于至少一种靶核酸和至少一种对比用核酸的扩增曲线的信号对背景信号做修正，

(b) 靶和对比用核酸的每一个扩增循环的循环到循环扩增效率ê(C)的计算，

(c) 靶和对比用核酸的循环到循环扩增效率ê(C)的随机性的量度M的计算，

(d) 循环数C_M的确定，其中M对于靶和对比用核酸是最小的，

(e) 从C_M值中计算特征性循环数C_C，

(f) 通过比较靶和对比用样品的C_C，与对比用核酸相比，确定样品中至少一种靶核酸中的每一种的相对量。

5.用于绝对定量样品中至少一种靶核酸的方法，其包括以下步骤：

(a) 获得的用于至少一种靶核酸和已知浓度的核酸标准品稀释系列的样品的扩增曲线的信号对背景信号做修正，

(b) 靶和标准样品的每一个扩增循环的循环到循环扩增效率ê(C)的计算，

(c) 靶和标准样品的循环到循环扩增效率ê(C)的随机性的量度M的计算，

(d) 循环数C_M的确定，其中M对于靶和标准样品是最小的，

(e) 从C_M值中计算特征性循环数C_C，

(f) 通过比较靶和标准样品的C_C确定样品中至少一种靶核酸中的每一种的初始量。