[发明专利]改进的猪肝酯酶有效
申请号: | 201080018177.4 | 申请日: | 2010-04-26 |
公开(公告)号: | CN102439142A | 公开(公告)日: | 2012-05-02 |
发明(设计)人: | 马丁·基尔特兹曼;哈拉德·皮希勒;赫尔马特·施瓦布;阿敏·艾尔-黑列比;安德里斯·布劳恩;克里斯汀·温科尔 | 申请(专利权)人: | 帝斯曼知识产权资产管理有限公司 |
主分类号: | C12N9/18 | 分类号: | C12N9/18 |
代理公司: | 北京东方亿思知识产权代理有限责任公司 11258 | 代理人: | 肖善强 |
地址: | 荷兰*** | 国省代码: | 荷兰;NL |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 改进 猪肝 | ||
1.一种具有酯酶活性的经分离的多肽或其同源物,所述多肽包含在SEQ ID NO’s 2、4、6、8、10、12或14的任何一条中所示的氨基酸序列,所述多肽或其同源物包含如在所述SEQ ID NO’s中所示的一个或多个氨基酸的氨基酸替代或缺失,其中,至少一个氨基酸替代或缺失在下述氨基酸位置上发生,所述氨基酸位置位于当单体形成多聚体时多个单体的相互作用点上,并且破坏了该多个单体间的相互作用点,并且导致如下的突变体多肽:在相同的条件下,相对于在E.coli中表达的没有一个或多个缺失或替代的多肽的澄清裂解液中作为可溶的活性蛋白存在的没有突变的多肽级分的浓度,在E.coli中表达的突变体多肽的澄清裂解液中作为可溶的活性蛋白存在的突变体多肽级分的浓度增加。
2.根据权利要求1的经分离的多肽,所述多肽包含具有与SEQ ID NO’s 2、4、6、8、10、12或14的任何一条具有超过90%,更优选超过95%同一性的氨基酸序列。
3.根据权利要求1-2的任何一项的经分离的多肽,较之没有氨基酸缺失或替代的对应野生型多肽的酯酶活性,所述多肽显示酯酶活性的至少10%的增加。
4.根据权利要求1-3的任何一项的经分离的多肽,其中,所述替代或缺失在选自43、260、263、266或270氨基酸位置或其对应位置的组的一个或多个位置上实现。
5.具有酯酶活性的经分离的多肽或其同源物,所述多肽包含在SEQ ID NO’s 2、4、6、8、10、12或14的任何一条中所示的氨基酸序列,所述同源物具有与SEQ ID NO’s 2、4、6、8、10、12或14中任何一条超过90%,优选超过95%,更优选超过98%同一性的氨基酸同一性,所述多肽或其同源物包含在43位置、260位置和/或263位置或其对应位置上的一个或多个氨基酸替代。
6.根据权利要求4或5的经分离的多肽,其中,所述氨基酸替代选自L43D、T260P、T260A、V263D、V263G或其对应位置的组。
7.根据权利要求1-6的任何一项的经分离的多肽,所述多肽包含选自L238V和F234S的组的至少一个其它突变。
8.核苷酸序列,所述核苷酸序列编码根据权利要求1-7的任何一项的多肽。
9.根据权利要求1-7的多肽用于产生酸、酯或醇的用途。
10.用于制造酸、酯或醇的方法,其中应用了根据权利要求1-7的任何一项的经分离的多肽。
11.根据权利要求10的方法,其中制造了α-烷基化酸和/或酯。
12.根据权利要求11的方法,其中光学纯的α-烷基化酸被还原为它们的对应的醇。
13.根据权利要求10或12,其中所述醇作为二肽模拟物的构建单元被进一步应用。
14.根据权利要求13的方法,其中所述构建单元被应用在降血压剂中。
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