[发明专利]使用PKC-θ抑制剂的免疫性疾病的离体治疗

说明书

技术领域

本发明涉及一种治疗通过PKC-θ的活性介导或维持的多种疾病和病症的方法，所述疾病和病症包括免疫性疾病和动脉粥样硬化。

发明背景

蛋白激酶C家族是一类丝氨酸/苏氨酸激酶，其包含12种相关的同工酶。这些激酶广泛地在组织和细胞类型中表达。其成员通过不同的基因编码，且根据其活化的要求分为亚类。经典PKC酶(cPKC)需要二酰基甘油(DAG)、磷脂酰丝氨酸(PS)和钙用于活化。新型PKC酶(nPKC)则需要DAG和PS但不依赖于钙。非典型PKC酶(aPKC)不需要钙或DAG。

PKC-θ是nPKC亚家族的成员之一。其具有受限的表达模式，主要发现于T细胞和骨骼肌中。一旦T细胞活化，便在T细胞和抗原提呈细胞(APC)之间的接触位点形成由超分子活化簇(SMAC)组成的免疫突触(IS)。发现PKC-θ是唯一集中于SMAC的PKC亚型(C.Monks等人，Nature，1997，385，83)，其位置靠近于介导T细胞活化过程的其他信号酶。在另一研究(G.Baier-Bitterlich等人，Mol.Cell.Biol.，1996，16，842)中，验证了PKC-θ在AP-1(其为IL-2基因活化中重要的转录因子)活化中的作用。在未刺激的T细胞中，组成性活性PKC-θ刺激AP-1活性，同时在细胞中显性失活PKC-θ，AP-1活性并不通过PMA活化而诱导。其他研究表明，PKC-θ通过IκB激酶β的活化介导NF-κB的活化(所述活化是由T细胞受体/CD28共刺激诱导)(N.Coudronniere等人，Proc.Nat.Acad.Sci.U.S.A.，2000，97，3394；X.Lin等人，Moll.Cell.Biol.，2000，20，2933)。PKC-θ敲除小鼠与野生型小鼠相比，外周T细胞的增殖(响应于T细胞受体(TCR)/CD28刺激)大大减少。另外，从T细胞释放的IL-2的量也大幅减少(Z.Sun等人，Nature，2000，404，402)。否则，PKC-θ敲除小鼠将显得正常并且能繁殖。

上面引用的研究以及其他研究确证了PKC-θ在T细胞活化、细胞因子(如IL-2)的随后释放以及T细胞增殖中的关键作用(A.Altman等人，Immunology Today，2000，21，567)。因此PKC-θ的抑制剂将在治疗免疫性疾病及其他由T细胞的异常活化介导的疾病中具有治疗益处。

目前公认T细胞在调节免疫应答中起重要作用(Powrie和Coffman，Immunology Today，1993，14，270)。事实上，T细胞的活化常常是免疫性疾病的起始事件。TCR活化之后，T细胞活化所需的钙流入。一旦活化，T细胞产生细胞因子(包括IL-2)，致使T细胞增殖、分化并产生效应子作用。使用IL-2抑制剂的临床研究表明，干扰T细胞活化和增殖可有效地抑制体内免疫应答(Waldmann，Immunology Today，1993，14，264)。因此，抑制T淋巴细胞活化及其后细胞因子产生的药物对于在需要这种免疫抑制的患者中选择性地抑制免疫应答是治疗有用的，因此其可用于治疗免疫性疾病，例如自身免疫性疾病和炎性疾病。

美国专利申请公开号US 2005/0124640(在此引入作为参考)公开了作为PKC-θ的抑制剂的式(I)化合物，其用于治疗多种由PKC-θ介导的疾病，包括免疫性疾病。

发明概述

在总的方面中，本发明涉及一种治疗患者的免疫性疾病或动脉粥样硬化的方法，所述方法包括用PKC-θ抑制剂离体处理来自患者的血液，然后将经处理的血液重新给予至该患者。

在本发明的另一方面中，将白细胞成分从患者血液中分离，并用PKC-θ抑制剂离体处理，然后重新给予至该患者。

在本发明的另一方面中，将Treg细胞从患者血液中分离，并用PKC-θ抑制剂离体处理，然后重新给予至该患者。

在本发明的另一方面中，将Treg细胞从患者血液中分离，诱导其生长以产生更大量的Treg细胞，并用PKC-θ抑制剂离体处理，然后重新给予至该患者。

在本发明的另一方面中，所述PKC-θ抑制剂为式(I)化合物

其中R₁、R₂和R₃在本文中定义。