[发明专利]对生物学样品中的物质进行检测的方法

权利要求书

1.一种对生物学样品中的物质进行检测的方法，其包括：

1)准备融合蛋白以及结合有生物素的担载体，所述融合蛋白是与待检测物质特异性结合的蛋白质和生物素结合性蛋白质的融合蛋白；

2)通过生物素-生物素结合性蛋白质之间的结合，使工序1)准备的担载体与融合蛋白结合，从而制作结合有融合蛋白的担载体；

3)将(a)生物学样品、以及

(b-i)细胞破碎提取液和生物素结合性蛋白质，该细胞破碎提取液是由与用于表达工序1)的融合蛋白的宿主细胞相同种的细胞制备的细胞破碎提取液，或者

(b-ii)由下述细胞制备的细胞破碎提取液，所述细胞是在与用于表达工序1)的融合蛋白的宿主细胞相同种的细胞中通过基因工程技术表达了生物素结合性蛋白质的细胞；

混合后添加至由工序2)制作的结合有融合蛋白的担载体中；然后，

4)对与蛋白质结合的被检测物质进行检测，所述蛋白质是与融合蛋白中的待检测物质特异性结合的蛋白质。

2.一种对生物学样品中的物质进行检测的方法，其包括：

1)准备融合蛋白以及结合有生物素的担载体，所述融合蛋白是与待检测物质特异性结合的蛋白质和生物素结合性蛋白质的融合蛋白；

2)通过生物素-生物素结合性蛋白质之间的结合，使工序1)准备的担载体与融合蛋白结合，从而制作结合有融合蛋白的担载体；

3)使工序2)制作的结合有融合蛋白的担载体与生物素结合性蛋白质接触，从而进行担载体的封闭；

4)在工序3)的封闭工序后，向结合有融合蛋白的担载体添加生物学样品，然后，

5)对与蛋白质结合的被检测物质进行检测，所述蛋白质是与融合蛋白中的待检测物质特异性结合的蛋白质。

3.一种对生物学样品中的物质进行检测的方法，其包括：

1)准备融合蛋白以及结合有生物素的担载体，所述融合蛋白是与待检测物质特异性结合的蛋白质和生物素结合性蛋白质的融合蛋白；

2)通过生物素-生物素结合性蛋白质之间的结合，使工序1)准备的担载体与融合蛋白结合，从而制作结合有融合蛋白的担载体；

3)使工序2)制作的结合有融合蛋白的担载体与生物素结合性蛋白质接触，从而进行担载体的封闭；

4)在工序3)的封闭工序后，将(a)生物学样品，以及

(b-i)细胞破碎提取液和生物素结合性蛋白质，该细胞破碎提取液是由与用于表达工序1)的融合蛋白的宿主细胞相同种的细胞制备的细胞破碎提取液，或者

(b-ii)由下述细胞制备的细胞破碎提取液，所述细胞是在与用于表达工序1)的融合蛋白的宿主细胞相同种的细胞中通过基因工程技术表达了生物素结合性蛋白质的细胞；

混合后添加至结合有融合蛋白的担载体中；然后，

5)对与蛋白质结合的被检测物质进行检测，所述蛋白质是与融合蛋白中的待检测物质特异性结合的蛋白质。

4.根据权利要求1或3所述的方法，其中，在权利要求1的工序3(b-i)或权利要求3的工序4(b-i)中，添加由含任意载体的细胞提取的细胞破碎提取液作为细胞破碎提取液。

5.根据权利要求1～4中的任一项所述的方法，其中，生物素结合性蛋白质是tamavidin或其突变体。

6.根据权利要求1～5中任一项所述的方法，其中，生物学样品选自血液、血清、脑脊髓液、唾液、汗、尿、泪、淋巴液以及母乳。

7.一种用于检测生物学样品中的物质的担载体，其通过生物素-生物素结合性蛋白质之间的结合与融合蛋白结合，所述融合蛋白是与待检测物质特异性结合的蛋白质和生物素结合性蛋白质的融合蛋白，所述用于检测生物学样品中的物质的担载体通过下述方法制备：

1)准备融合蛋白以及结合有生物素的担载体，所述融合蛋白是与待检测物质特异性结合的蛋白质和生物素结合性蛋白质的融合蛋白；

2)通过生物素-生物素结合性蛋白质之间的结合，使工序1)准备的担载体与融合蛋白结合，从而制作结合有融合蛋白的担载体；

3)使工序2)制作的结合有融合蛋白的担载体与生物素结合性蛋白质接触，从而进行担载体的封闭。

8.一种用于对生物学样品中的物质进行检测的试剂盒，其包含：

A)通过生物素-生物素结合性蛋白质之间结合而与融合蛋白结合的担载体，所述融合蛋白是与待检测物质特异性结合的蛋白质和生物素结合性蛋白质的融合蛋白，以及

用于稀释生物学样品的包含下述B-i)或者B-ii)的试剂；

B-i)细胞破碎提取液和生物素结合性蛋白质，所述细胞破碎提取液是由与用于表达A)的融合蛋白的宿主细胞相同种的细胞制备的细胞破碎提取液，或者

B-ii)由在与用于表达A)的融合蛋白的宿主细胞相同种的细胞中通过基因工程技术表达了生物素结合性蛋白质的细胞制备的细胞破碎提取液；和/或

C)含生物素结合性蛋白质的封闭剂。