[发明专利]用于增加蛋白质产生的芽孢杆菌属菌株有效
申请号: | 201080026055.X | 申请日: | 2010-06-02 |
公开(公告)号: | CN102803290A | 公开(公告)日: | 2012-11-28 |
发明(设计)人: | 克里斯蒂娜·邦焦尔尼;欧金尼奥·费拉里 | 申请(专利权)人: | 丹尼斯科美国公司 |
主分类号: | C07K14/32 | 分类号: | C07K14/32;C12N9/12;C12N9/16;C12N1/21 |
代理公司: | 北京市中咨律师事务所 11247 | 代理人: | 胡志君;黄革生 |
地址: | 美国加利*** | 国省代码: | 美国;US |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 用于 增加 蛋白质 产生 芽孢 杆菌 菌株 | ||
1.宿主细胞,其包含rap操纵子,所述rap操纵子包含至少一个失活的phr和/或至少一个失活的rap基因。
2.权利要求1所述的宿主细胞,其中所述宿主细胞过量表达YmaH。
3.权利要求1或2所述的宿主细胞,其中所述宿主细胞还包含重组核酸。
4.权利要求1-3任一项所述的宿主细胞,其中所述宿主细胞还包含编码目的蛋白的多核苷酸序列。
5.权利要求4所述的宿主细胞,其中所述重组核酸包含与编码目的蛋白的所述多核苷酸序列有效连接的启动子。
6.权利要求5所述的宿主细胞,其中所述启动子是野生型或突变的aprE启动子。
7.权利要求4-6任一项所述的宿主细胞,其中所述宿主细胞以比不包含至少一个失活phr和/或rap基因的宿主细胞所产生水平高的水平产生所述目的蛋白。
8.权利要求7所述的宿主细胞,其中所述目的蛋白是酶。
9.权利要求8所述的宿主细胞,其中所述酶是蛋白酶。
10.权利要求1-8任一项所述的宿主细胞,其中所述的至少一个失活rap基因是rapA基因。
11.权利要求1-10任一项所述的宿主细胞,其中所述的至少一个失活phr基因选自phrA、phrE、phrC、phrF、phrG、phrI和phrK。
12.权利要求11所述的宿主细胞,其中所述的至少一个失活phr基因是phrA。
13.权利要求11所述的宿主细胞,其中所述的至少一个失活phr基因是phrE。
14.权利要求1至13任一项所述的宿主细胞,其中所述宿主细胞包含至少一个失活的phr基因和至少一个失活的rap基因。
15.权利要求14所述的宿主细胞,其中所述的失活rap基因是rapA基因。
16.权利要求14-15任一项所述的宿主细胞,其中所述的至少一个失活phr基因选自phrA、phrE、phrC、phrF、phrG、phrI和phrK。
17.权利要求16所述的宿主细胞,其中所述的至少一个失活phr基因是phrA。
18.权利要求16所述的宿主细胞,其中所述的至少一个失活phr基因是phrE。
19.权利要求1-18任一项所述的宿主细胞,其包含失活的phrA基因、失活的phrE基因、失活的rapA基因和编码目的蛋白的重组核酸。
20.权利要求19所述的宿主细胞,其中所述目的蛋白是酶。
21.权利要求20所述的宿主细胞,其中所述酶是蛋白酶。
22.权利要求1至21任一项所述的宿主细胞,其中所述宿主细胞是芽孢杆菌属(Bacillus sp.)宿主细胞。
23.权利要求22所述的宿主细胞,其中所述的芽孢杆菌属宿主细胞是嗜碱芽孢杆菌(Bacillus alkalophilus)、解淀粉芽孢杆菌(Bacillus amyloliquefaciens)、短芽孢杆菌(Bacillus brevis)、环状芽孢杆菌(Bacillus circulans)、克劳氏芽孢杆菌(Bacillus clausii)、凝固芽孢杆菌(Bacillus coagulans)、坚强芽孢杆菌(Bacillus firmus)、灿烂芽孢杆菌(Bacillus lautus)、迟缓芽孢杆菌(Bacillus lentus)、地衣芽孢杆菌(Bacillus licheniformis)、巨大芽孢杆菌(Bacillus megaterium)、短小芽孢杆菌(Bacillus pumilus)、嗜热脂肪芽孢杆菌(Bacillus stearothermophilus)、枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)或苏云金芽孢杆菌(Bacillus thuringiensis)细胞。
24.权利要求22或23所述的宿主细胞,其中所述的芽孢杆菌属宿主细胞是枯草芽孢杆菌宿主细胞。
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