[发明专利]氧化胁迫抗性的双歧杆菌

说明书

本发明一般地涉及双歧杆菌领域。特别地，本发明涉及双歧杆菌领域，所述双歧杆菌具有对H₂O₂改进的抗性。

益生菌因为它们促进健康的性质而被选择。由于益生菌作为活的生物发挥它们的益处(Guarner，F.和G.J.Schaafsma.1998.″Probiotics″.Int.J.Food Microbiol.39：237-238)，所述细菌应该在胃肠道条件下存活。在工业应用中，大规模的生产需要益生菌耐受食品加工和贮存的额外的能力。这些生产步骤以不同的胁迫为特征，所述胁迫危害所述细菌的良好存活。在它们中间，高或者低温、高的渗透压、氧化和湿度可能是关键的因素。

特别地，已知益生菌的一些种类具有对不利的温度、氧或者喷雾干燥的耐受性。具有差的胁迫耐受性的此类益生菌的突出的实例是例如双歧杆菌，特别是长双歧杆菌(Simpson，P.J.，C.Stanton，G.F.Fitzgerald，和R.P.Ross.2005.″Intrinsic tolerance of Bifidobacterium species to heat and oxygen and survival following spray drying and storage″.J.Appl.Microbiol.99：493-501)。

特别地，双歧杆菌的厌氧性质需要定制的发酵条件来促进大规模生产，并且通常需要额外的努力来保持在加工和贮存中细胞的活性。

在细菌界中存在对氧的耐受性的非常大的区别。厌氧细菌已经进化了精巧的防御系统来保护它们自身免于活性氧类别(ROS)引起的损害。然而，即使对于这些细菌，当这些防御系统受到损伤时，氧可以是有毒性的。主要可以形成三种不同的活性氧类别(ROS)，其取决于氧接受一个、两个或者三个电子从而分别形成(i)超氧化物自由基(O^2-)，(ii)过氧化氢(H₂O₂)或者(iii)羟基自由基(^·OH^·)(Imlay，J.A.，2002，Advances in Microbial Physiology，Vol 4646：111-153.)。H₂O₂引起DNA损伤和蛋白质的氧化。细菌可以使用一些酶来消除这种ROS，所述酶包括过氧化氢酶、NADH过氧化物酶和还原酶。

为处理该问题和增加食品生产中益生菌的存活率，目前使用了一些方法，其包括微囊化、保护剂的添加、不透氧的包装以及生长或者加工条件的改进。

然而，这些方法是复杂的并且施行起来是费劲的，同时通常需要添加其他的化合物，所述化合物可能具有副作用并且其在最终产品中可能是不想要的。

因此，本发明的目的是克服现有技术的这些问题和为本领域提供益生性双歧杆菌，并且提供增加组合物中存活的益生菌的数目的方法，所述益生性双歧杆菌显示出对氧化胁迫改进的抗性和/或改进的氧耐受性。

通过根据权利要求1的双歧杆菌，根据权利要求2的组合物和根据权利要求8的用途解决了本发明的目的。

本发明人应用自然筛选方法并且已经寻找到了双歧杆菌菌株，其具有对活性氧类别例如H₂O₂增加的抗性。

一种典型的益生菌是长双歧杆菌。

本发明人能鉴定和分离长双歧杆菌NCC2916，其允许实现本发明的目的。长双歧杆菌NCC2916-通过自然筛选得到的长双歧杆菌NCC2705的衍生物-与现有技术的双歧杆菌相比令人惊奇地显示改进的氧耐受性。通过自然筛选得到的菌株具有解决本发明的目的而没有通过基因技术被修饰的优点。

特别地，长双歧杆菌菌株NCC2916显示对H₂O₂改进的抗性。

因此，本发明的一个实施方案是长双歧杆菌NCC2916。

按照布达佩斯条约将长双歧杆菌NCC2916保藏在CNCM中；巴斯德研究所，25；Rue du Docteur Roux；F-75724 Paris Cedex 15，保藏号CNCM I-4053。

本发明也涉及包含长双歧杆菌NCC2916的组合物。