[发明专利]用于细胞衰老的筛查方法

说明书

技术领域

本发明涉及筛查以鉴定对细胞的衰老具有作用的化合物的方法，更具体地说是涉及细胞的世代衰老、诊断与细胞的世代寿命中的变化相关的疾病的方法。

背景技术

雷帕霉素复合物TORC1的标靶从酵母到人类是保守的，并在细胞的营养和胁迫状态的感受和信号转导因而在控制细胞生长^1-5和细胞存活^6-11之间的平衡中起到关键的作用。在出芽酵母中，TORC1促进在葡萄糖上的生长并下调呼吸^12，13。TORC1含有磷脂酰肌醇激酶(PI3-K)相关激酶Tor1或Tor2。与Fpr1(Fk506敏感型脯氨酸旋转异构酶)形成复合物的大环内脂雷帕霉素¹⁴与Tor1/2结合，导致细胞可能由于Tor激酶¹⁶的底物特异性的变化而进入类似于营养受限¹⁵的状态。细胞的这种新状态与基因表达的模式中的变化关联，特别是与需要呼吸和胁迫耐性^{6，10，17，18}的基因表达的模式中的变化有关。很多TORC1基因的表达依赖于转录共激活剂复合物的SAGA家族，所述转录共激活剂复合物包括SAGA(Spt-Ada-Gcn5-乙酰基转移酶)1^9，20、SLIK(SAGA样)²¹和SALSA(SAGA变体，缺失Spt8)^22-24。SAGA、SLIK和SALSA含有赖氨酸乙酰基转移酶(KAT)Gcn5^21-23，其中以组蛋白H3(H3K14ac)上的赖氨酸作为底物，但是在它们的丰度、它们所调控的基因以及亚基组成上存在差异^19，24。

本发明人已经发现，H3K18乙酰基化对于控制细胞生长和寿命(longevity)之间的平衡是重要的。本发明人还鉴定了涉及到SAGASLIK和SALSA复合物的众多基因，所述基因受到破坏将导致世代寿命的提高。

发明内容

根据本发明的第一方面，提供了用于提高细胞的世代寿命的方法，所述方法包括破坏所述细胞中的SAGA、SLIK和/或SALSA复合物中的至少一个的功能。

根据本发明的第二方面，提供了用于鉴定细胞的世代寿命(CLS)的潜在调节剂的方法，所述方法包括如下步骤：

i)使具有已知组蛋白3赖氨酸18(H3K18)乙酰化状态的细胞与受检化合物接触；和

ii)确定所述化合物对所述细胞中的H3K18的所述乙酰化状态是否具有作用；

其中，所述细胞中的H3K18的乙酰化状态的变化表示所述化合物调节CLS。

根据本发明的第三方面，提供了细胞的CLS的调节剂，所述调节剂由第二方面的所述方法进行鉴定。

根据本发明的第四方面，提供了用于鉴定细胞的复制状态的方法，所述方法包括鉴定H3K18的乙酰化状态，其中存在H3K18的乙酰基修饰表示所述细胞是活性复制细胞，并且不存在H3K18的乙酰基修饰表示不再复制的细胞。

根据本发明的第五方面，提供了用于鉴定细胞的CLS的变化的方法，所述方法包括鉴定所述细胞中的H3K18的乙酰化状态和将该状态与对照细胞的乙酰化状态进行比较，其中，当与所述对照细胞比较时失去H3K18Ac表示CLS提高，并且当与所述对照细胞比较时获得H3K18Ac表示CLS降低。

根据本发明的第六方面，提供了用于诊断与细胞的CLS中的变化关联的疾病的方法，所述方法包括鉴定事先从受治对象分离的细胞中的H3K18的乙酰化状态和将所述乙酰化状态与对照细胞的乙酰化状态进行比较。

具体实施方式

应当理解的是，在此描述的述及本发明的一个方面的任何优选的实施方式在合适的情况下可以等同适用于本发明的任意其他方面。

根据本发明的第一方面，提供了用于提高细胞的世代寿命的方法，所述方法包括破坏所述细胞中的SAGA、SLIK和/或SALSA复合物中的至少一个的功能。

在此使用的术语“世代寿命”是指静止期培养物中的细胞存活的时间。

应当理解的是，SAGA、SLIK和/或SALSA复合物中的所述至少一个的功能可以直接或间接地进行破坏。这些复合物在控制细胞的乙酰化状态和CLS中发挥关键的作用，但是它们的水平不同，它们的水平取决于细胞的状态及其环境。