[发明专利]产生具有免疫调节作用的乳的食物的筛选方法

说明书

技术领域

本发明涉及产生具有免疫调节作用的乳的食物的筛选方法，其适用于食品和动物饲料等领域。

背景技术

生物体免疫基本上是为了对抗外来攻击的“防御”目的而起作用。例如，相当于所述“防御”的癌细胞的防御和消除，和在此情况中有效作用的免疫的增强。

另一方面，免疫的反应过度，即“超免疫”，可不利地影响生物体。其实例包括过敏反应、自身免疫病和慢性炎症等。已知，在这种情况下，通过抑制炎性细胞因子(inflammatory cytokines)如IL-6、TNF-α和IL-1的产生来改善症状。

另外，逐渐变的明确的是，为了对抗外来攻击的“防御”目的而起作用的免疫增强作用和为了抑制由超免疫反应诱导的过敏反应、自身免疫病、慢性炎症等而起作用的免疫抑制作用受到微小RNA(microRNA)(下文还简称为“miRNA”)的调节。

在miRNA从基因组转录后，其进行两次切割变为约22个碱基的非编码小RNA。已知，作为其功能，miRNA以序列互补的方式结合至靶mRNA的3′非翻译区来抑制靶mRNA的翻译。一种miRNA抑制细胞中多种mRNA的翻译从而调节细胞的各种功能。特别是对其与癌症发生和进展的关系已进行许多报道，并且miRNA和疾病间的关系引起了关注。

例如，就miR-181而言，已报道其涉及B细胞的发育、T细胞的活化以及免疫的发育(非专利文献1至3)。

就miR-155而言，已知其通过活化先天免疫(非专利文献1和4)和调节T细胞和B细胞的分化和功能(非专利文献1和5)涉及免疫发育，通过，其通过调节Th1/Th2平衡(非专利文献1和6)以及维持调节T细胞(其抑制超免疫反应)的功能(非专利文献7)涉及抗过敏和抗炎作用。

miR-17和miR-92协同调节B细胞和T细胞的分化和发育，从而参与免疫发育(非专利文献1、8和9)。

已知miR-223通过控制嗜中性粒细胞的增殖和活化参与防御(非专利文献1和10)，miR-150通过抑制B细胞的分化参与防御(非专利文献1和11)，以及let-7i通过控制胆管细胞中TLR4的表达参与防御(非专利文献12)。

已知miR-125通过抑制TNF-α的产生参与抗炎作用(非专利文献1和13)。

已知miR-146通过负调控先天免疫参与防御(非专利文献1和14)，并且通过控制Th 1/Th2平衡参与抗过敏(非专利文献15)。

最近已报道在细胞内作为翻译调节分子而起作用的miRNA存在于称为外泌体(exo some)的脂双层内，并分泌出细胞(非专利文献16)。由于还证实分泌的miRNA被其他细胞所吸收，提示存在依靠miRNA的细胞间相互作用。另外，已知外泌体存在于各种人体体液中。特别地，已报道在人血浆和血清中存在miRNA，已提出其作为前列腺癌或子宫癌的生物标记的可能用途(非专利文献17)。

除血浆和血清外，包含外泌体的体液包括唾液、尿、羊水和母乳(非专利文献17)。在这些中，母乳是由哺乳动物在特定时期产生的体液，并负责个体间即母婴间物质的转移。此外，母乳不仅是孩子的营养补给，而且还将母体获得的免疫物质给予孩子。

母乳包含分泌型IgA、乳铁蛋白、溶菌酶和细胞因子等，母乳被认为保护婴儿免受感染，并促进婴儿的免疫发育(非专利文献19)。实际上，已知依靠母乳成长的孩子，与不以此方式成长的孩子，涉及较低的支气管或肠道感染的风险。母乳包含显示抗菌活性的IgA、乳铁蛋白、糖蛋白、糖脂等，以及调节免疫细胞的细胞因子。然而，迄今研究中分析的对象主要为包含于母乳中的蛋白质，尽管有关于包含于母乳中的核酸的报道，但对包含于母乳并具有特定序列的核酸的研究还未报道。

此外，还已知受环氧酶2表达控制的乳腺细胞(mammaryglandular cell)的发育是由miR-101a调节的(非专利文献20)。然而，这并不表明miRNA存在于乳中。

另外，在本申请的优先权日后，有报道称微小RNA存在于来源于牛乳的微泡(microve sicle)中(非专利文献21)，并且在不同哺乳期的新鲜牛乳、商购液体乳和奶粉中鉴定出微小RNA(非专利文献22)。

现有技术文献

[非专利文献]

非专利文献1：Lindsay，M.A.，Trends Immunol，29：343-351，2008

非专利文献2：Li，Qi-Jing等人，Cell，129：147-161，2007