[发明专利]败血症的质谱诊断有效

专利信息
申请号: 201080032009.0 申请日: 2010-07-14
公开(公告)号: CN102471798A 公开(公告)日: 2012-05-23
发明(设计)人: T·梅尔 申请(专利权)人: 布鲁克·道尔顿公司
主分类号: C12Q1/04 分类号: C12Q1/04;G01N33/68;G01N33/569
代理公司: 北京北翔知识产权代理有限公司 11285 代理人: 张广育;姜建成
地址: 德国*** 国省代码: 德国;DE
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摘要:
搜索关键词: 败血症 诊断
【权利要求书】:

1.用于对血液中微生物进行质谱鉴定的方法,包括以下步骤:

-通过添加表面活性剂溶解来自所述血液培养物的血液样品中的

血细胞,

-通过离心或过滤沉淀所述微生物,

-获取所述微生物的质谱,

-通过所述质谱鉴定所述微生物。

2.根据权利要求1的方法,其中通过培养产生足够数量的血液中的微生物。

3.根据权利要求1或2的方法,其中清洗通过离心沉淀的所述微生物并再次进行离心。

4.根据权利要求1至3中任一项的方法,其中将十二烷基硫酸钠(SDS)用作所述表面活性剂。

5.根据权利要求1至4中任一项的方法,其中所添加的表面活性剂为溶液形式。

6.根据权利要求5的方法,其中所述表面活性剂溶液中含有消泡剂。

7.根据权利要求1至6中任一项的方法,其中将抗凝血剂添加到所述血液样品中。

8.根据权利要求1至7中任一项的方法,其中将一种或多种核酸酶添加到所述血液样品中。

9.根据权利要求1至8中任一项的方法,其中用蒸馏水稀释用于所述血液样品的所述血液,稀释比例在1∶2和1∶10之间。

10.根据权利9的方法,其中用蒸馏水稀释用于所述血液样品的所述血液,稀释比例为约1∶5。

11.根据权利要求1至10中任一项的方法,其中将所述血液样品离心,去除上清液,然后添加所述表面活性剂溶液。

12.根据权利要求1至11中任一项的方法,其中利用生理-化学方法将所述沉淀的微生物分解。

13.根据权利要求12的方法,其中用含有酸如甲酸或三氟乙酸和有机溶剂如乙腈的溶液分解所述沉淀的微生物。

14.根据权利要求1至13中任一项的方法,其中使用基质物质在质谱样品载板上进行测量样品的制备,其中所述沉淀微生物的可溶性蛋白质包埋在所述基质物质的晶体中。

15.根据权利要求1至13中任一项的方法,其中所述测量样品的制备包括把一些所述沉淀的微生物转移到质谱样品载板上,向所述质谱样品载板上添加基质溶液。

16.根据权利要求14或15的方法,其中用基质辅助激光解吸电离(MALDI)飞行时间质谱仪来进行所述质谱测量。

17.根据权利要求1至16中任一项的方法,其中使用沉淀的微生物来确定它们对抗生素的抗性。

18.用于从血液、脓肿、炎症组织样品或粘膜擦拭样品获得未经人蛋白质污染的纯形式的微生物的方法,所述微生物用于进行质谱鉴定,其中用表面活性剂破坏所述血液、脓肿、炎症组织样品或粘膜擦拭样品的内源性人细胞,并且通过离心或过滤将所述微生物以沉淀形式从所述液体中分离。

19.用于根据权利要求1至18中任一项的对血液中微生物的质谱鉴定的分析试剂盒,包含含消泡剂的即用表面活性剂溶液。

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