[发明专利]HMGB1结合核酸分子及其用途

说明书

技术领域

本发明涉及与HMGB1蛋白质结合的核酸分子及其用途。 

背景技术

高迁移率族蛋白1(high-mobility group box 1 protein)，即，HMGB1蛋白质(以下称为“HMGB1”)是生存所必需的蛋白质(非专利文献1)，在细胞核内作为形成转录开始所需的染色质结构的蛋白质起作用(非专利文献2)。HMGB1一旦渗漏、分泌到细胞外时，即作为促进炎症反应、细胞形态变化和细胞移动的细胞因子起作用(非专利文献3)。近年，细胞外的HMGB1的功能分析得到发展，明确了自身免疫疾病、败血症、创伤性休克、缺血和缺血再灌注损伤发生时，会使炎症反应恶化或者诱导细胞凋亡。由此显示出HMGB1成了治疗这些疾病的靶标物质和诊断标志物(非专利文献4)。另外，关于癌症，也报告了HMGB1与乳腺癌、大肠癌、黑色素瘤、前列腺癌、胰腺癌和肺癌等的增殖和转移浸润有关，与正常组织相比，HMGB1表达量有所增加(非专利文献5)。基于这种背景，希望通过制造能与HMGB1结合的物质、中和其作用来预防和治疗上述疾病。但是，到目前为止，显示出有效性的仅仅只有利用了单克隆抗HMGB1抗体的诊断方法以及实验动物中的脑梗塞模型治疗(专利文献1、2、非专利文献6)。 

现有技术文献 

专利文献 

专利文献1：专利第3876325号公报 

专利文献2：特开2008-520552号公报 

非专利文献 

非专利文献1：Calogero，S.et al.Nat.Genet.(1999)22，276-280。 

非专利文献2：Bustin，M.Mol.Cell Biol.(1999)19，5237-5246。 

非专利文献3：Andersson，U.et al.J.Leukoc.Biol.(2002)72，1084-1091。 

非专利文献4：Klune，J.R.et al.Mol.Med.(2008)14，476-484。 

非专利文献5：Ellerman，J.E.et al.Clin.Cancer Res.(2007)13，2836-2848。 

非专利文献6：Liu，K.et al.FASEB J.(2007)21，3904-16。 

发明内容

本发明要解决的问题 

本发明目的在于，例如，提供能够与HMGB1结合的核酸分子，作为在阐明与HMGB1有关而引起的疾病的发病机理、上述疾病的诊断和治疗中能够利用的物质，以及提供其用途。 

用于解决技术问题的手段 

因此，本发明的发明人以市售的精制HMGB1为靶标物质，通过体外选择法制作RNA。本发明的HMGB1结合核酸分子是以与HMGB1蛋白质(以下称为HMGB1)的解离常数为5×10^-7以下为特征的能够与HMGB1结合的结合核酸分子。 

本发明的组合物是以包含本发明的HMGB1结合核酸分子为特征的组合物。 

本发明的检测试剂是以含有上述本发明的HMGB1结合核酸分子为特征的、用于检测上述HMGB1的HMGB1检测试剂。 

发明的效果 

本发明的HMGB1结合核酸分子能够与HMGB1结合。因此，通过本发明的HMGB1结合核酸分子，例如能够通过与HMGB1结合抑制其功能，由此预防和治疗由于HMGB1而引起的前述那样的疾病。另外，通过本发明的HMGB1结合核酸分子，例如能够通过确认有无与HMGB1的结合，来检测HMGB1，能够早期诊断疾病。另外，例如，通过使本发明的 HMGB1结合核酸分子在培养细胞内表达，能够进行基因转录抑制实验，使用本发明的HMGB1结合核酸分子，能够进行HMGB1与其受体的细胞外结合抑制实验等，本发明的HMGB1结合核酸分子也可以在对HMGB1的功能阐明中使用。因此，本发明的HMGB1结合核酸分子作为新的研究用工具也是有用的。 

附图说明

图1是示出本发明的实施例1中的各RNA适体针对附加有His-标签的HMGB1的结合能力的图。 

图2是示出本发明的实施例1中、各RNA适体针对HMGB1的结合能力的图。 

图3是示出本发明的实施例1中、各RNA适体针对附加有His-标签的MIF蛋白质的结合能力的图。 

图4是示出本发明的实施例1中、生理条件下各RNA适体针对HMGB1的结合能力的图。