[发明专利]作为氧化应激标志物的GP91PHOX的体外检测法

权利要求书

1.通过测定作为氧化应激标志物的可溶性gp91^phox的水平而体外检测NADPH氧化酶之激活的方法，该方法在选自血清、血浆、细胞培养物上清液和细胞裂解物的生物液体中进行，所述方法包括以下步骤：

(i)将生物液体与针对gp91^phox或其对应肽的抗体接触，所述肽优选为选自SEQ ID NO：1的肽或SEQ ID NO：3的肽及其相应混合物；

(ii)检测抗体/gp91^phox复合物或抗体/gp91^phox肽复合物的形成；

所述方法可选地包括以下另外步骤：

(iii)使用gp91^phox的标准物制备物、优选用于引发抗体的肽的制备物构建校正曲线，所述肽选自SEQ ID NO：1的肽和SEQ ID NO：3的肽；和

(iv)使用步骤(iii)的校正曲线计算样品中的gp91^phox或其对应肽的浓度。

2.用于评价治疗法的有效性的方法，所述治疗法是例如使用抗炎试剂或抗高血糖试剂治疗患有关节炎或糖尿病的患者中的败血病的治疗法，或用于治疗心血管疾病、例如高血压、动脉粥样硬化、心脏肥大和心肌梗塞的治疗法，或以他汀类药物治疗高胆固醇血患者的治疗法，所述方法包括通过权利要求1的方法检测NADPH氧化酶的激活中的变化。

3.用于检测NADPH氧化酶之激活的gp91^phox的细胞外部分。

4.用于检测氧化应激的选自SEQ ID NO：1和SEQ ID NO：3的肽序列或包括它们的肽序列。

5.编码权利要求3的肽的核苷酸序列。

6.针对权利要求3的肽的多克隆或单克隆抗体。

7.根据权利要求5的单克隆抗体，其获自于2010年6月10日保藏于美国典型培养物保藏中心(ATCC)的保藏号为SD-6311的杂交瘤。

8.于2010年6月10日保藏于美国典型培养物保藏中心(ATCC)的保藏号为SD-6311的杂交瘤。

9.用于实施权利要求1或2的方法的试剂盒，其包含来自杂交瘤SD-6311的单克隆抗体。

10.权利要求9的试剂盒，还包含常规用于ELISA方法的试剂。

11.生物液体中的可溶性gp91^phox蛋白或其对应肽用作氧化应激的标志物的用途，其中所述生物液体选自血清、血浆、细胞培养物上清液和细胞裂解物。

12.权利要求10的用途，其中所述肽选自SEQ ID NO：1的肽和SEQID NO：3的肽以及对应的肽片段和包含肽序列。

13.权利要求11-12的用途，所述用途用于评价治疗法的有效性，所述治疗法是例如使用抗炎试剂或抗高血糖试剂治疗患有关节炎或糖尿病的患者中的败血病的治疗法，或用于治疗心血管疾病、例如高血压、动脉粥样硬化、心脏肥大和心肌梗塞的治疗法，或以他汀类药物治疗高胆固醇血患者的治疗法。

14.针对gp91^phox或其对应肽的多克隆或单克隆抗体用于检测所述蛋白在生物液体中的存在以检测受试者或细胞培养系统中的氧化应激的用途，其中所述生物液体选自血清、血浆、细胞培养物上清液和细胞裂解物。

15.权利要求14的用途，其中所述单克隆抗体是来自杂交瘤SD-6311的单克隆抗体。