[发明专利]用于培养干细胞和祖细胞的方法有效

专利信息
申请号: 201080035642.5 申请日: 2010-06-11
公开(公告)号: CN102549146A 公开(公告)日: 2012-07-04
发明(设计)人: 辛西娅·巴姆达德 申请(专利权)人: 米纳瓦生物技术公司;辛西娅·巴姆达德
主分类号: C12N5/02 分类号: C12N5/02;C12N11/00;C12N11/06
代理公司: 北京康信知识产权代理有限责任公司 11240 代理人: 李丙林;张英
地址: 美国马*** 国省代码: 美国;US
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摘要:
搜索关键词: 用于 培养 干细胞 细胞 方法
【权利要求书】:

1.一种在表面上培养、扩增或培育干细胞或干细胞样细胞或诱导多能干细胞的方法,包括通过结合于所述表面和所述细胞的配体将所述细胞连接于所述表面。

2.根据权利要求1所述的方法,其中,所述配体直接地或通过媒介物间接地结合于所述表面。

3.根据权利要求2所述的方法,其中,所述媒介物为化学连接子或另一种蛋白或者它们的组合。

4.根据权利要求3所述的方法,其中,所述蛋白为蛋白A或蛋白G。

5.根据权利要求3所述的方法,其中,所述连接子为光敏感的或化学敏感的。

6.根据权利要求2所述的方法,其中,所述配体或所述媒介物非特异性地吸附于所述表面,或通过亲和标记-结合配偶体相互作用共价偶联或连接于所述表面。

7.根据权利要求1所述的方法,其中,所述配体与聚合物连接。

8.根据权利要求1所述的方法,其中,所述配体特异性地结合于多肽,所述多肽在所述干细胞或干细胞样细胞或诱导多能干细胞上表达。

9.根据权利要求1所述的方法,其中,所述配体为抗体或生长因子。

10.根据权利要求8所述的方法,其中,所述细胞的表面上的所述多肽为MUC1或MUC1*、SSEA3、SSEA4、Tra 1-81或Tra 1-60。

11.根据权利要求10所述的方法,其中,所述细胞的表面上的所述多肽为MUC1*

12.根据权利要求9所述的方法,其中,所述抗体特异性地结合于PSMGFR或C-10PSMGFR。

13.根据权利要求9所述的方法,其中,所述生长因子为野生型NM23、或NM23-S120G突变体、或bFGF。

14.一种用于培养干细胞或干细胞样细胞或诱导多能干细胞的方法,其中,将所述细胞暴露于含有与具有PSMGFR序列的肽结合的试剂的培养基中。

15.根据权利要求14所述的方法,其中,所述试剂为抗体。

16.根据权利要求14所述的方法,其中,所述试剂为野生型NM23或NM23-S120G突变体。

17.一种培养干细胞或干细胞样细胞或诱导多能干细胞的方法,包括将所述细胞暴露于含有从MUC1*阳性癌细胞分泌的试剂的培养基中。

18.根据权利要求17所述的方法,其中,所述MUC1*阳性细胞选自T47D、ZR-75-30、或ZR-75-1。

19.一种培养干细胞或干细胞样细胞或诱导多能干细胞的方法,包括将所述细胞暴露于来自MUC1*阳性癌细胞的条件培养基中。

20.根据权利要求19所述的方法,其中,所述MUC1*阳性细胞选自T47D、ZR-75-30、或ZR-75-1。

21.根据权利要求1所述的方法,其中,所述表面不是基质胶。

22.根据权利要求1所述的方法,其中,在无成纤维细胞饲养细胞的条件下培养所述细胞。

23.根据权利要求1所述的方法,其中,不进行手动剥离而移除所述细胞。

24.一种从根据权利要求1所述的方法而培育的细胞中收获细胞的方法,包括加入与所述配体结合的竞争分子,以使所述细胞从结合于所述配体或所述表面释放。

25.一种从根据权利要求1所述的方法而培育的细胞中收获细胞的方法,包括裂解结合于所述表面且直接或间接连接于所述细胞的连接子,以使所述细胞从所述表面释放。

26.一种识别细胞分化状态的方法,包括使用抗MUC1*抗体结合于所述细胞,其中,抗MUC1*抗体的阳性信号指示多能细胞状态,而显示为与未剪切MUC1结合的细胞指示分化细胞状态。

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