[发明专利]存活预后分析

说明书

技术领域

本发明涉及用于测定对象或个体可能存活的预后分析和试剂盒。

背景技术

有多个先前已确定的因子，当这些因子在诸如人类个体等对象中测量时可预示所述个体可能长期存活。这些因子包括例如胆固醇、C-反应蛋白(CRP)和抑半胱氨酸蛋白酶蛋白C(cystatin C)。这些化合物的水平升高与糖尿病、高血压和心血管疾病和肾损伤有关。

对于作为分析患者中宽范围单克隆免疫球蛋白病(monoclonal gammopathies)的途径，申请人已研究游离轻链多年。这样的游离轻链在诊断中的应用在书籍“Serum Free Light Chain Analysis，Fifth Edition(2008)A.R.Bradwell等，ISBN 0704427028”中有详细综述。

抗体包括重链和轻链。它们通常具有双重对称并且包含两个相同的重链和两个相同的轻链，各自包含可变区和恒定区结构域。每个轻链/重链对的可变区结构域结合形成抗原结合部位，使得两个链都有助于抗体分子的抗原结合特异性。轻链为两种类型：κ和λ，任何给定的抗体都是由任一轻链产生，但从不由两种轻链一起产生。人体中产生的κ分子大约为λ分子的两倍，但这在一些哺乳动物中不同。轻链通常与重链连接。然而，在个体的血清或尿中可检测到一些未连接的“游离的轻链”。游离轻链可通过产生抗游离轻链表面的抗体来特异地鉴定，所述游离轻链表面通常因轻链与重链的结合而被隐藏。在游离轻链(FLC)中此表面被暴露，使得其可以通过免疫学检测。用于检测κ或λ游离轻链的可商购试剂盒包括例如The Binding Site Limited，Birmingham，United Kingdom生产的“Freelite^TM”。申请人先前已确定，测量游离κ、游离λ的量和/或游离κ/游离λ比例能够检测患者中的单克隆免疫球蛋白病。其已被用作辅助例如完整免疫球蛋白型多发性骨髓瘤(MM)、轻链MM、非分泌MM、AL淀粉样变性病、轻链沉淀疾病(light chain deposition disease)、潜伏性MM(smouldering MM)、浆细胞瘤和MGUS(未确定临床意义的单克隆免疫球蛋白病)的诊断。还已将FLC的检测用作例如辅助其他B-细胞恶液质(B-cell dyscrasia)的诊断，且甚至用作通常用于诊断单克隆免疫球蛋白病的尿Bence Jones蛋白分析的可选方案。

常规地，期望增加λ或κ轻链中的一种。例如，多发性骨髓瘤由恶性浆细胞的单克隆增殖导致，其引起产生单一类型免疫球蛋白的单一类型细胞的增加。这导致在个体中观察到λ或κ游离轻链的量增加。此浓度增加可以被测定，并且通常测定游离κ与游离λ的比例并与正常范围相比较。这有助于单克隆疾病的诊断。此外，游离轻链分析还可以用于患者中随后的疾病治疗。例如在治疗AL淀粉样变性病后，可以进行患者的预后。

Katzman等(Clin.Chem.(2002)；48(9)：1437-1944)讨论了在单克隆免疫球蛋白病的诊断中游离κ和游离λ免疫球蛋白的血清参考区间和诊断范围。通过免疫分析研究了年龄为21-90岁的个体，并与通过免疫固定获得的结果相比较，以优化用于检测患有B-细胞恶液质的个体中单克隆游离轻链(FLC)的免疫分析。

记录κ和λFLC的量和κ/λ比例，以允许测定用于B-细胞恶液质检测的参考区间。

发明内容

申请人现已确定对于FLC、特别是总FLC的分析可以用于预测个体的长期存活，即使当个体是明显健康的对象时也是如此。他们已发现FLC浓度在统计学上显著地与长期存活相关。此外，此关系似乎与现有的长期存活预后标志物例如胆固醇、肌酸酐(creatinine)、抑半胱氨酸蛋白酶蛋白C和C-反应蛋白的关系相似或优于这些关系。

来自明显健康的个体血清中的FLC浓度在某种程度上受到个体肾过滤和排泄FLC能力的影响。在其中FLC清除受限制的个体中，发现血清中FLC水平增加。结果，目前认为FLC是肾功能的良好标志物。由于单体FLCκ分子(25kDa)的大小与二聚λ分子(50kDa)的大小不同，因此它们一起是优于例如抑半胱氨酸蛋白酶蛋白C(10kDa)的肾小球过滤的更好的标志物。然而，与抑半胱氨酸蛋白酶蛋白C相比较，在B-细胞增殖期间产生FLC是多种疾病的结果，因此血清FLC通常不被单独地用作肾功能标志物。数据显示即使在患有慢性肾病(CKD)的患者中，FLC仍给出存活的可能性，与肾功能无关。