[发明专利]靶向PAX2用于治疗乳腺癌

说明书

本申请要求于2010年2月18日提交的美国专利申请号12/708,294的优先权，以及于2009年8月24日提交的美国专利申请号12/546,292的优先权。

发明背景

乳腺癌是女性最常见的癌症原因，并且在美国是女性第二大常见的癌症死亡原因。虽然多数初期乳腺癌是基于发现乳腺影像异常来诊断的，但是肿块或乳腺组织坚实度的变化也可能是疾病的警报信号。过去几十年内提高乳腺癌风险意识已致使进行乳腺摄影筛查的女性数量增加，导致更早期检测癌症并且由此提高存活率。尽管如此，乳腺癌是45至55岁女性最常见的死亡原因。

已知许多类型的癌症是由遗传畸变即突变引起的。突变的积聚和细胞控制功能受损致使从正常组织到早期癌前的进行性表型变化，如上皮内瘤变(IEN)到日益严重的IEN到浅表癌以及最终到浸润性疾病。该过程通常在几年甚至十几年内相对缓慢地发生，虽然在一些情况下可能相对迅速。癌基因依赖是，癌细胞对维持恶性表型的单一癌基因的连续活化或过表达的生理依赖。这种依赖发生于标志肿瘤进程的其它变化的环境中。

浸润性癌症的长期进程为临床干预提供了时机。因此，重要的是鉴定指征癌前疾病的生物标志物，以便可以采取治疗措施预防或延缓浸润性癌症的发展。

发明概述

本发明一方面涉及预防或治疗个体中乳腺疾病的方法。所述方法包括向个体乳腺组织给予抑制PAX2表达或PAX2活性的组合物。

在一实施方案中，所述乳腺疾病是乳腺癌或乳腺上皮内瘤变(MIN)。

在另一实施方案中，所述抑制PAX2表达包括向个体的乳腺癌组织或MIN组织给予编码PAX2siRNA的核酸。

在相关实施方案中，所述siRNA包含选自以下的序列：SEQ ID NO：3-6和11-15。

在另一实施方案中，所述组合物包含抑制PAX2与DEFB1启动子结合的寡核苷酸。

在相关实施方案中，所述寡核苷酸包含正向或反向的SEQ ID NO：1。

在相关实施方案中，所述寡核苷酸包含X1GGAACX2序列，其中X1和X2是与DEFB1编码序列中SEQ ID NO：1的邻近核苷酸互补的0至30个核苷酸。

在相关实施方案中，所述寡核苷酸包含选自以下的序列：SEQ IDNO：18-21，25，26，28和29。

在另一实施方案中，所述组合物包含RAS信号通路的阻断剂。

在另一实施方案中，所述组合物包含选自以下的拮抗剂：血管紧张素II的拮抗剂，血管紧张素II受体的拮抗剂，血管紧张素转化酶(ACE)的拮抗剂，丝裂原活化蛋白激酶(MEK)的拮抗剂，ERK1，2(细胞外信号调节激酶)的拮抗剂，以及信号转导及转录活化因子3(STAT3)的拮抗剂。

还公开了治疗个体中乳腺癌或MIN的方法，所述方法包括增强个体乳腺癌组织或MIN组织中的DEFB1表达。

在一实施方案中，增强DEFB1表达包括向个体的乳腺癌组织或MIN组织给予有效量的DEFB1。

在另一实施方案中，增强DEFB1表达包括向个体的乳腺癌组织或MIN组织给予有效量的编码DEFB1的表达载体。

还公开的是用于治疗个体乳腺疾病的方法，所述方法包括(a)测定来自所述个体的患病乳腺组织中PAX2-比-DEFB1的表达率；(b)测定来自所述个体的所述患病乳腺组织的ER/PR状态；以及(c)基于(a)和(b)的结果，向所述个体的乳腺组织给予组合物，所述组合物(1)抑制PAX2表达或PAX2活性，(2)表达DEFB1，或(3)抑制PAX2表达或PAX2活性并且表达DEFB1。

附图简要说明

附图与说明书一起阐述本发明的一个或多个实施方案，用于说明本发明的原理。只要有可能，整个附图所使用的相同附图标记是指实施方案的相同或类似元件。

图1A至1D给出β-防御素-1(DEFB1)表达的定量RT-PCR(QRT-PCR)分析。

图2给出DEFB1诱导膜完整性和细胞形态改变的显微镜分析。黑色箭头指示膜波动，白色箭头指示凋亡小体。

图3给出前列腺癌细胞中DEFB1的细胞毒性分析。用PonA处理前列腺细胞系DU145、PC3和LNCaP来诱导DEFB1表达1-3天，之后进行MTT测定以确定细胞活力。结果表示为平均值±标准偏差，n＝9。

图4A和4B给出由DEFB1诱导DU145和PC3细胞的细胞死亡。

图5给出DEFB1诱导之后的泛半胱天冬酶(pan-caspase)分析。