[发明专利]重组RSV抗原

说明书

相关申请的交叉引用

本申请要求2010年5月13日提交的美国临时申请61/334,568和2009年6月24日提交的61/219,964的较早申请日的权利，所述申请的公开内容通过引用并入本文。

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背景

本公开涉及免疫学领域。更具体地说，本公开涉及用于引发对呼吸道合胞病毒(RSV)的特异免疫反应的组合物和方法。

人呼吸道合胞病毒(RSV)是全球6个月以下婴儿和妊娠期短于或等于35周的早产儿中下呼吸道感染(LRI)的最常见病因。RSV疾病的谱系包括多种呼吸道症状，从鼻炎和中耳炎到肺炎及毛细支气管炎，后两种疾病引起相当高的发病率和死亡率。人类是唯一已知的RSV贮主。被污染的鼻分泌物中的病毒通过大的呼吸道飞沫进行传播，因此传播需要与被感染个体或被污染表面的紧密接触。RSV可以在玩具或其它物品上存活几个小时，这就解释了特别是在儿科病房中医院源性RSV感染的高发生率。

每年全球RSV感染和死亡的数字据估计分别是64million和160,000。仅在美国，估计RSV即造成每年18,000到75,000例住院和90到1900例死亡。在温带气候，大量记录表明RSV是造成每年冬天急性LRI流行病，包括毛细支气管炎和肺炎的原因。在美国，几乎所有儿童到两岁时均感染过RSV。RSV相关LRI在除此以外健康的儿童中的发生率据计算是两岁前每1000个儿童年龄有37例(小于6个月的婴儿中是每1000个儿童年龄有45例)，住院风险是每1000个儿童年龄有6个(每1000个6个月以下儿童年龄)。在患有心肺疾病和早产的儿童中发生率更高，这些儿童构成了美国RSV相关入院的几乎一半。经历过RSV引起的更严重LRI的儿童以后发生儿童期哮喘的几率增加。这些研究展示了在工业化国家，由于对患有严重LRI及其后遗症的患者的护理成本极高，对RSV疫苗及其使用的广泛需求。RSV还逐渐被认为是造成老年人中流感样疾病的重要原因。

已尝试了各种方法希望产生安全有效的RSV疫苗，能够在健康和有风险的群体中引发持久和保护性的免疫反应。但是目前为止，评估过的候选物中没有一个被证明作为预防RSV感染和/或减少或预防RSV疾病，包括下呼吸道感染(LRIs)的疫苗是安全有效的。

发明概述

本公开涉及重组呼吸道合胞病毒(RSV)抗原。更具体地说，本公开涉及包含重组F蛋白的抗原，其中所述F蛋白经过修饰以便稳定三聚体融合前构象。公开的重组抗原表现出极佳的免疫原性，尤其适合作为抗RSV感染和/或疾病的免疫原性组合物(例如疫苗)的成分。还公开了编码所述重组抗原的核酸、含有抗原的免疫原性组合物，以及制备和使用抗原的方法。

附图简述

图1A是突出RSV F蛋白结构特点的示意图。图1B是示范性RSVPrefusion F(PreF)抗原的示意图。

图2的线状图显示了PreF的非对称场流分离(asymmetrical field flow fractionation)(AFF-MALS)分析的代表性结果。

图3的条形图显示了PreF抗原对人血清的中和抑制。

图4A和B的条形图显示了小鼠应答PreF抗原引发的血清IgG效价。

图5A和B的条形图显示了PreF抗原引发的RSV特异中和抗体的效价。

图6A和B显示了RSV PreF抗原给小鼠提供的抗攻击保护作用。

图7评估了免疫和攻击后的BAL白细胞。

图8的条形图展示了用和水包油乳剂(AS03)稀释液一起成剂的PreF免疫后，引发的血清IgG。

图9的条形图展示了用和水包油乳剂(AS03)稀释液一起成剂的PreF免疫后，中和抗体的效价。

图10的条形图展示了用和水包油乳剂(AS03)稀释液一起成剂的PreF免疫后，抗攻击的保护作用。

发明详述

简介