[发明专利]蛋白质糖基化无效
申请号: | 201080039421.5 | 申请日: | 2010-09-03 |
公开(公告)号: | CN102695791A | 公开(公告)日: | 2012-09-26 |
发明(设计)人: | B·雷恩;R·朗顿 | 申请(专利权)人: | 伦敦卫生及热带医学学院 |
主分类号: | C12N9/10 | 分类号: | C12N9/10;C12N1/20;A61K39/02;C12N15/52;C12N15/63 |
代理公司: | 北京泛华伟业知识产权代理有限公司 11280 | 代理人: | 刘丹妮 |
地址: | 英国*** | 国省代码: | 英国;GB |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 蛋白质 糖基化 | ||
1.一种使用载体转化的微生物细胞,所述的载体含有选自以下的核苷酸序列:
i)由如图1a表示的核酸序列组成的核酸分子;
ii)由在严格的杂交条件下与(i)中的核酸分子杂交的核酸序列所组成的核酸分子并且该核酸序列编码多肽;其中所述的细胞表达重组多肽,该重组多肽是所述的寡糖基转移酶的底物。
2.根据权利要求1所述的微生物细胞,其中所述的细胞使用核酸分子进行转化,所述的核酸分子包含核苷酸序列,所述的核苷酸序列编码如图1b中的氨基酸序列表示的寡糖基转移酶多肽;或者编码变体多肽,且所述的变体多肽包含经修饰的图1b所表示的氨基酸序列,所述修饰是通过至少一个氨基酸残基的缺失、添加或取代进行并且所述的经修饰的氨基酸序列保持或者增强了寡糖基转移酶活性。
3.根据权利要求1或2所述的微生物细胞,其中所述的载体是表达载体,该表达载体适合表达编码寡糖基转移酶多肽的核酸分子。
4.根据权利要求1-3中任一项所述的微生物细胞,其中所述的重组多肽包含至少一个由以下氨基酸序列构成的肽基序:
Asp/Glu-Xaa1-Asn-Xaa2-Ser/Thr
其中Xaa1和Xaa2是除脯氨酸之外的任意氨基酸。
5.根据权利要求1-4中任一项所述的微生物细胞,其中所述的重组多肽是从传染性病原体中分离的抗原。
6.根据权利要求5所述的微生物细胞,其中所述的传染性病原体是细菌性病原体。
7.根据权利要求5或者6所述的微生物细胞,其中所述的病原体选自:肺炎链球菌、猪链球菌、海豚链球菌(streptococcus inae)、无乳链球菌、停乳链球菌、马链球菌、乳房链球菌、米勒链球菌组(SMG)、血链球菌、牛链球菌、链球菌A组、肺炎克雷伯菌、产酸克雷伯菌、植生克雷伯菌(Klebsiella planticola)、铜绿假单胞菌(Pseudomonas aerunginosa)、鲍氏不动杆菌(Acinetobcater baumanii)、醋酸钙不动杆菌、伤寒沙门菌(Salmonella enterica serovar Typhi)、空肠弯曲杆菌、结肠弯曲杆菌、红嘴鸥弯曲杆菌、流感嗜血杆菌、幽门螺旋杆菌、脑膜炎双球菌、淋病奈瑟菌、乳酰胺奈瑟菌、志贺菌属、葡萄球菌属、艰难梭状芽胞杆菌、肉毒杆菌、炭疽杆菌、类鼻疽伯克霍尔德氏菌、鼻疽伯克霍尔德氏菌、乳酸杆菌属、破伤风杆菌、白喉棒状杆菌、霍乱弧菌(Vibrio cholerae)、大肠杆菌、结核分枝杆菌、百日咳博德特氏菌、胸膜肺炎放线杆菌,病毒衍生的抗原,例如人乳头瘤病毒(HPV)、甲型肝炎、乙型肝炎、轮状病毒以及流感病毒、得自寄生虫如恶性疟原虫(Plasmodium faciparum)的抗原。
8.根据权利要求7所述的微生物细胞,其中所述的病原体选自表皮葡萄球菌、金黄色葡萄球菌、人葡萄球菌、溶血性葡萄球菌、沃氏葡萄球菌、头状葡萄球菌、解糖葡萄球菌、耳葡萄球菌、模仿葡萄球菌、腐生性葡萄球菌、科氏葡萄球菌、木糖葡萄球菌、科氏葡萄球菌、沃氏葡萄球菌、猪葡萄球菌、山羊葡萄球菌、鸡葡萄球菌、中间葡萄球菌、人葡萄球菌。
9.根据权利要求1-8中任一项所述的微生物细胞,其中所述的寡糖基转移酶多肽使用荚膜(K)抗原修饰所述重组多肽。
10.根据权利要求1-8中任一项所述的微生物细胞,其中所述的寡糖基转移酶多肽使用荚膜O抗原修饰所述重组多肽。
11.根据权利要求1-8中任一项所述的微生物细胞,其中所述的寡糖基转移酶多肽使用胞外多糖/表面多糖修饰所述重组多肽。
12.根据权利要求6或7所述的微生物细胞,其中所述的重组抗原多肽包含氨基酸序列或者其抗原部分或者变体氨基酸序列,或者由氨基酸序列或者其抗原部分或者变体氨基酸序列组成,所述的氨基酸序列选自图4a-4e中表示的序列,其中所述的变体是图4a-4e中表示序列的至少一个氨基酸残基的缺失、取代或添加。
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