[发明专利]口蹄疫病毒病毒(FMDV)共有蛋白质、其编码序列及由其制备的疫苗

说明书

发明领域

本发明涉及合成的共有(consensus)口蹄疫病毒(FMDV)免疫原性蛋白和编码此类蛋白的核酸分子、抗FMDV的疫苗、用于诱导抗FMVD的免疫反应的方法、用于区分被FMDV感染的个体与已接种的抗FMDV的个体的方法以及预防性和/或治疗性免疫个体以抗FMDV的方法。

发明背景

口蹄疫是驯养和野生偶蹄动物(包括牛、猪、山羊和鹿)的高度接触性传染病，其在宿主细胞中快速复制并且传播至接触易感性动物。该疾病的特征在于发热、跛行以及舌、足、口鼻部和乳头的水疱性病变，从而导致成年动物的高发病率但死亡率较低。病原体(causative agent)为口蹄疫病毒(FMDV)(细小RNA病毒科的口疮病毒属的种的类型)。FMDV为由二十面体衣壳(具有4种结构蛋白VP1-4，每一种蛋白60个拷贝)包围的约8500个碱基的单链正义RNA基因组并且在抗原性上高度可变，具有几个亚型(包括A、Asia 1、O、C、SAT1、SAT2和SAT3)。最近口蹄疫在许多先前无疾病国家(包括1997年在台湾、2001年在英国和荷兰的暴发)以及在几个南美国家的出现已提高了对该经济破坏性病毒的认识。此外，全世界都在关注可能的恐怖分子袭击可能利用FMDV攻击例如1000亿美元/年畜牧业的国家。

先前控制FMDV的措施包括宰杀感染的或接触传染病的动物和排除污染。如果国家在最近暴发后3个月呈现无FMDV状况，则因FMDV暴发而宰杀它们的家畜的国家才可有重新开始家畜活动。国家通常将接种动物以治疗FMDV暴发用作最后一着，因为已接种动物并且未宰杀动物的国家必须等待整整一年来恢复无FMD状态。然而国家期望在任何FMDV暴发之前接种它们的动物并且能够保持它们的无FMD状态。

过去，FMDV疫苗包括化学灭活的完整病毒抗原和佐剂；然而，对此存在不利方面，因为其需要昂贵的高污染制造设施来生产疫苗。在过去25-30年中，研究者一直努力开发在单次接种后提供保护作用的疫苗。这些努力包括从病毒颗粒纯化的VP1、生物工程改造的VP1、VP1肽、化学合成VP1肽、表达VP1表位的活载体的使用、利用编码VP1表位的DNA的接种以及使用从FMDV感染的培养物产生的全长衣壳蛋白VP1-4或通过复制缺陷型人腺病毒5型(Ad5)载体进行的VP1-4的递送。所有这些方法仅给接种的动物提供有限数量的跨所有FMDV病毒亚型的表位。

因此，在本领域存在对诊断FMDV感染的哺乳动物的疫苗和方法的需要，所述疫苗和方法适合于提供抗跨FDMV的不同亚型的多个表位的保护作用。

发明概要

本文中提供了分离的核酸，所述核酸包含编码口蹄疫病毒亚型A、Asia 1、C、O、SAT1、SAT2、SAT3、SAT4的VP1-4的共有氨基酸序列的序列或其互补序列。所述核酸可包括选自(a)SEQ ID NO：17-23；(b)编码24-30的氨基酸序列的核苷酸序列；(c)(a)的80％变体；和(a)或(b)的互补序列的序列。还提供了包含异源序列的载体，其中所述异源序列由上述序列组成。