[发明专利]用于哺乳动物来源的神经胶质限制性祖细胞的扩增、鉴定、表征和效能增强的方法和组合物有效
申请号: | 201080051269.2 | 申请日: | 2010-11-09 |
公开(公告)号: | CN102686721A | 公开(公告)日: | 2012-09-19 |
发明(设计)人: | 罗伯特·桑德罗克;詹姆斯·T·坎帕内利;德波拉·A·埃普斯泰因 | 申请(专利权)人: | Q医疗公司 |
主分类号: | C12N5/071 | 分类号: | C12N5/071;C12N13/00 |
代理公司: | 中原信达知识产权代理有限责任公司 11219 | 代理人: | 张颖;樊卫民 |
地址: | 美国*** | 国省代码: | 美国;US |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 用于 哺乳动物 来源 神经 胶质 限制性 细胞 扩增 鉴定 表征 效能 增强 方法 组合 | ||
1.一种用于制造哺乳动物神经胶质限制性祖细胞(GRP)的方法,所述方法包括:
(a)从能够产生A2B5阳性细胞的哺乳动物组织源分离A2B5抗体反应性细胞;
(b)A2B5阳性细胞在基质上体外培养的天数(DIV)大于6天;以及
(c)收获培养的细胞。
2.权利要求1的方法,其中A2B5抗体反应性细胞使用磁性活化细胞分选来分离。
3.权利要求2的方法,其中将细胞两次以上通过包含磁珠的柱,以分离A2B5抗体反应性细胞。
4.权利要求1的方法,其中A2B5抗体反应性细胞使用荧光活化细胞分选或免疫淘选来分离。
5.权利要求4的方法,其中将细胞两次以上通过荧光活化细胞分选或免疫淘选皿。
6.权利要求1的方法,其中将细胞培养10-20-DIV。
7.权利要求1的方法,其中将细胞培养15-20DIV。
8.权利要求1的方法,其中将细胞培养至少20DIV。
9.权利要求1的方法,其中将细胞培养100DIV以上。
10.一种用于制造哺乳动物神经胶质限制性祖细胞(GRP)的方法,所述方法包括:
(a)将哺乳动物神经组织解离成细胞悬液;
(b)分离A2B5抗体反应性细胞;
(c)A2B5阳性细胞在基质上体外培养的天数(DIV)大于6天;以及
(d)收获培养的细胞。
11.权利要求10的方法,其中哺乳动物神经组织从神经管闭合后的哺乳动物中获得。
12.权利要求10的方法,其中哺乳动物神经组织是胎儿尸体前脑组织、胎儿尸体脊髓组织、或哺乳动物活检脑或脊髓组织。
13.权利要求10的方法,其中哺乳动物是人,并且神经组织是妊娠14至24周的胎儿尸体前脑组织。
14.权利要求10的方法,其中解离神经组织通过酶法进行。
15.权利要求10的方法,其中解离神经组织通过机械法进行。
16.权利要求10的方法,其中解离神经组织通过机械法和酶法进行。
17.权利要求10的方法,其中A2B5抗体反应性细胞使用磁性活化细胞分选来分离。
18.权利要求17的方法,其中将细胞两次以上通过包含磁珠的柱来分离A2B5抗体反应性细胞。
19.权利要求10的方法,其中A2B5抗体反应性细胞使用荧光活化细胞分选或免疫淘选来分离。
20.权利要求19的方法,其中将细胞两次以上通过荧光活化细胞分选或免疫淘选皿。
21.权利要求10的方法,其中将细胞培养10-20-DIV。
22.权利要求10的方法,其中将细胞培养15-20DIV。
23.权利要求10的方法,其中将细胞培养至少20DIV。
24.权利要求10的方法,其中将细胞培养100DIV以上。
25.一种用于减少GRP细胞群中可能不想要的细胞表型和/或降低GRP细胞群细胞中的标准偏差的方法,所述方法包括:
(a)从能够产生A2B5阳性细胞的哺乳动物组织源中分离A2B5抗体反应性细胞,以及
(b)A2B5阳性细胞在基质上体外培养的天数(DIV)大于6天。
26.权利要求25的方法,其还包括将收获的细胞冷冻和融化。
27.一种用于减少GRP细胞群中可能不想要的细胞表型和/或降低GRP细胞群细胞中的标准偏差的方法,所述方法包括:
(a)将哺乳动物神经组织解离成细胞悬液;
(b)分离A2B5抗体反应性细胞;
(c)A2B5阳性细胞在基质上体外培养的天数(DIV)大于6天;以及
(d)收获培养的细胞。
28.权利要求25的方法,其还包括将收获的细胞冷冻和融化。
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