[发明专利]合成Ac-Arg-环(Cys-D-Ala-His-D-Phe-Arg-Trp-Cys)-NH2的方法

说明书

发明背景

本发明涉及使用溶液相肽化学来合成黑皮质素类似物Ac-Arg-环(Cys-D-Ala-His-D-Phe-Arg-Trp-Cys)-NH₂的新方法。

Ac-Arg-环(Cys-D-Ala-His-D-Phe-Arg-Trp-Cys)-NH₂是高效且药理学选择性的黑皮质素类似物。黑皮质素是一类调节肽，其由激素原前阿片黑素细胞皮质激素(POMC；长度131个氨基酸)的翻译后加工形成。POMC加工后形成三类激素：黑皮质素、促肾上腺皮质激素和多种内啡肽类(例如促脂解素)(Cone等人,Recent Prog.Horm.Res.,51:287-317,(1996)；Cone等人,Ann.N.Y.Acad.Sci.,31:342-363,(1993))。

在许多正常人类组织中已经发现黑皮质素，包括脑、肾上腺、皮肤、睾丸、脾、肾、卵巢、肺、甲状腺、肝、结肠、小肠和胰脏(Tatro,J.B.等人,Endocrinol.121:1900-1907(1987)；Mountjoy,K.G.等人,Science 257:1248-1251(1992)；Chhajlani,V.等人,FEBS Lett.309:417-420(1992)；Gantz,I.等人J.Biol.Chem.268:8246-8250(1993)和Gantz,I.等人,J.Biol.Chem.268:15174-15179(1993))。

已经证明黑皮质素肽类表现出广泛的生理活性，包括控制行为和记忆，影响神经营养和退热的特性，以及影响免疫系统调节。除了其熟知的对肾上腺皮质功能(促肾上腺皮质激素或“ACTH”)和对黑素细胞(促黑激素或“MSH”)的作用以外，黑皮质素还表现出控制心血管系统、止痛、温度调节以及释放其它神经元介质因子，包括催乳素、促黄体激素和生物胺类(De Wied,D.等人,Methods Achiev.Exp.Pathol.15:167-199(1991)；De Wied,D.等人,Physiol.Rev.62:977-1059(1982)；Guber,K.A.等人,Am.J.Physiol.257:R681-R694(1989)；Walker J.M.等人,Science 210:1247-1249(1980)；Murphy,M.T.等人,Science 221:192-193(1983)；Ellerkmann,E.等人,Endocrinol.130:133-138(1992)和Versteeg,D.H.G.等人,Life Sci.38:835-840(1986))。

已经证明黑皮质素的结合位点分布在许多不同的组织类型中，包括泪腺和颌下腺、胰腺、脂肪、膀胱、十二指肠、脾、脑和生殖腺组织以及恶性黑色素瘤中。迄今为止已经鉴定了五种黑皮质素受体。它们包括黑素细胞特异性受体(MC1-R)、肾上腺皮质特异性ACTH受体(MC2-R)、黑皮质素-3(MC3-R)、黑皮质素-4(MC4-R)和黑皮质素-5受体(MC5-R)。全部此类黑皮质素受体都对促黑激素(MSH)类的肽类激素有反应(Cone,R.D.等人,Ann.N.Y.Acad.Sci.,680:342-363(1993)；Cone,R.D.等人,Recent Prog.Horm.Res.,51:287-318(1996))。

MC1-R，本领域已知作为促黑激素受体(MSH-R)、促黑素细胞激素受体或黑皮质素-1受体，是属于G蛋白偶联受体家族的315个氨基酸的跨膜蛋白。MC1-R是MSH和ACTH受体。MC1-R的活性由激活腺苷酸环化酶的G蛋白介导。MC1-R受体在黑素细胞和肾上腺皮质组织以及其它组织例如肾上腺、白细胞、肺、淋巴结、卵巢、睾丸、垂体、胎盘、脾和子宫中发现。MC2-R，也称作促肾上腺皮质激素受体(ACTH-R)，是在黑素细胞和肾上腺皮质组织中发现的297个氨基酸的跨膜蛋白。MC2-R介导ACTH的促肾上腺皮质作用。在人类中，MC3-R是从脑组织中发现的360个AA的蛋白质；在大鼠和小鼠中，MC3-R是323个AA的蛋白质。MC4-R是332个氨基酸的跨膜蛋白，其在脑以及胎盘和肠组织中也有表达。MC5-R是325个氨基酸的跨膜蛋白，在肾上腺、胃、肺和脾中表达，在脑中以非常低的水平表达。MC5-R还在三层的肾上腺皮质中表达，主要是在产生醛固酮的丝球带细胞中表达。