[发明专利]伴侣蛋白10变异体

说明书

通过交叉引用结合

本申请要求于2009年10月9日提交的澳大利亚临时申请号2009904956的优先权，其全部内容通过交叉引用结合在此。

技术领域

本发明总体上涉及伴侣蛋白10N端变异体。更具体地说，本发明涉及具有增强的免疫调节能力和/或对于病原体相关分子模式（PAMP）和/或损伤相关分子模式（DAMP）具有增强的结合亲和力的伴侣蛋白10N端变异体。

背景

伴侣蛋白10（Cpn10），也称为早孕因子（EPF）和热休克蛋白10（Hsp10;HSPEl），作为有助于细胞蛋白质折叠的分子伴侣起作用。特别地，在不同细胞类型的线粒体中Cpn10已经显示与伴侣蛋白60（Cpn60）形成一种复合体。这种复合体负责折叠输入到线粒体中的多肽，防止肽聚结，并且将变性蛋白复活。

除了Cpn10的蛋白质折叠方面的作用之外，Cpn10还被认为涉及众多其他细胞过程。例如，已建议Cpn10调节与模式识别受体（PRR）相关的生物活性。当识别从病原微生物得到的特异性配体（称为“PAMP”（病原体相关分子模式）（例如脂肽，糖脂，核酸））和/或宿主衍生的配体（称为“DAMP”（损伤相关的分子模式）（例如核苷酸，核苷，基因，蛋白质））时，PRRS负责引发和驱动免疫应答。例如，PAMP结合到吞噬细胞（如巨噬细胞）表达的PRR上已经显示促进细胞内吞作用和破坏病原体。PAMP/DAMP结合到PRR上还在各种免疫细胞（如巨噬细胞，B淋巴细胞和树突状细胞）中引发一种或多种细胞信号级联，最终生产和分泌炎症介质（如细胞因子，趋化因子，活性氧等）。

最近的数据表明，Cpn10下调通过PRR信号诱导的促炎症反应分子的产生和分泌。Cpn10还暗含对PRR介导的抗炎性分子的产生和分泌进行正向调节。Cpn10调节PRR信号的能力提供了治疗多种免疫系统）活化相关疾病和病症（如炎性疾病）的手段。例如，施用Cpn10可以用于隔离负责引发PRR-信号传导的配体。进而这抑制了炎症介质的产生和释放，并且因此抑制免疫活化和炎症。

虽然Cpn10鉴定为一种免疫活化的抑制剂，但是存在对于预防和/或治疗炎性疾病和病症改进剂的需要。理想情况下，这类试剂将能够以增强的亲和力结合到PRR配体上，由此抑制由PRR信号介导的炎性分子的产生和分泌。

总结

如在此展示的，已发现对Cpn10多肽N端结构域特异性的改变增强了与PAMP和DAMP的结合。这进而被认为增强了Cpn10变异体的免疫抑制能力，并且特别地是它对由PRR信号诱导的炎症介质的产生和释放的影响。

在一个第一方面中，本发明提供了一种分离的伴侣蛋白10（Cpn10）变异体多肽，该多肽与野生型Cpn10多肽具有至少70％序列一致性，并且包括与所述野生型多肽相比较延长至少两个额外氨基酸残基的一个N端。

在该第一方面的一个实施方案中，这种分离的伴侣蛋白10（Cpn10）变异体多肽与这种野生型Cpn10多肽具有至少80％的序列一致性。

在该第一方面的另一个实施方案中，这种分离的伴侣蛋白10（Cpn10）变异体多肽与这种野生型Cpn10多肽具有90％的序列一致性。

在该第一方面的另一个实施方案中，这种分离的伴侣蛋白10（Cpn10）变异体多肽与这种野生型Cpn10多肽具有至少95%的序列一致性。在该第一方面的一个实施方案中，与这种野生型Cpn10多肽相比较，这种分离的伴侣蛋白10（Cpn10）变异体多肽具有增加的免疫调节功能。

在该第一方面的一个实施方案中，与野生型Cpn10对于病原体相关分子模式（PAMP）的结合亲和力相比较，这种变异体多肽具有对于PAMP增加的结合亲和力。

在该第一方面的一个实施方案中，与野生型Cpn10对于损伤相关分子模式（DAMP）的结合亲和力相比较，这种变异体多肽具有对于DAMP增加的结合亲和力。

在该第一方面的另一个实施方案中，与Ala-Cpn10（SEQ ID NO：3）相比较，这种分离的伴侣蛋白10（Cpn10）变异体多肽具有增加的免疫调节功能。

在该第一方面的一个实施方案中，与Ala-Cpn10（SEQ ID NO：3）对于病原体相关分子模式（PAMP）的结合亲和力相比较，这种变异体多肽具有对于PAMP增加的结合亲和力。