[发明专利]枯草蛋白酶变体

权利要求书

1.一种亲本枯草杆菌蛋白酶的变体，其包含取代9{R,K,H}、15{G，A,S,T,M}、68{G，A,S,T,M}、218{D,S,G，V}和245{R,K,H}，其中所述变体进一步包含至少一种下述的修饰：61{D,E}、62{D,E}、76{D,E}、*97aG、98{G，S}、99G、101G、120{V，Q,D}、131{T,S}、137H、194P、228V、230V、261D，其中所述位置对应于SEQ ID NO:2[BPN’]的成熟多肽的位置。

2.权利要求1的变体，其中所述变体包含取代G61E。

3.权利要求1或2的变体，其中所述变体包含取代A98S。

4.权利要求1-3任一项的变体，其中所述变体包含取代S99G。前述任一项权利要求的变体，其中所述变体包含下述取代：S9R、A15T、G61E、V68A、A98S、S99G、N218D和Q245R。

5.前述任一项权利要求的变体，其中所述亲本枯草杆菌蛋白酶是包含与SEQ ID NO:1具有至少80%同一性的氨基酸序列的多肽。

6.前述任一项权利要求的变体，其中所述亲本枯草杆菌蛋白酶属于亚组I-S2。

7.前述任一项权利要求的变体，其中所述变体与亲本枯草杆菌蛋白酶相比具有一个或多个改善的性质，其中所述改善的性质包括洗涤性能、稳定性、催化活性和洗碟性能。

8.一种分离的多核苷酸，其编码权利要求1-7任一项的变体。

9.一种核酸构建体，其包含权利要求8的多核苷酸。

10.一种表达载体，其包含权利要求9的核酸构建体。

11.一种宿主细胞，其包含权利要求10的核酸构建体。

12.一种清洁或去污剂组合物，优选地洗衣或洗碟组合物，其包含权利要求1-8任一项的变体。

13.一种产生权利要求1的变体的方法，其通过将下述取代导入亲本枯草杆菌蛋白酶：

i.在位置9用{R,K,H}的取代；

ii.在位置15用{G，A,S,T,M}的取代；

iii.在位置68用{G，A,S,T,M}的取代；

iv.在位置245用{R,K,H}的取代，和

v.在位置218用{D,S,G或V}的取代

和一种或多种下述修饰：在位置61用{D,E}取代，在位置62用{D,E}取代，在位置76用{D,E}取代，在位置97插入G，在位置98用{G，S}取代，在位置99用G取代，在位置101用G取代，在位置120用{V，Q,D}取代，在位置131用{T,S}取代，在位置137用H取代，在位置194用P取代，在位置228用V取代，在位置230用V取代，在位置261用D取代，其中所述位置对应于SEQ ID NO:2[BPN’]的成熟多肽的位置。

14.权利要求13的方法，其中将下述取代导入所述亲本枯草杆菌蛋白酶：

i.在位置9用R取代S；

ii.在位置15用T取代A；

iii.在位置68用A取代V；

iv.在位置245用R取代Q，和

v.在位置218用{D,S,G或V}取代N

和一种或多种下述修饰：在位置61用E取代G，在位置62用D取代N，在位置76用D取代N，在位置97插入G，在位置98用S取代A，在位置99用G取代S，在位置101用G取代S，在位置120用D取代H，在位置131用T取代P，在位置137用H取代Q，在位置194用P取代A，在位置228用V取代A，在位置230用V取代A，在位置261用D取代N。

15.权利要求13或14的方法，其中所述亲本枯草杆菌蛋白酶属于I-S2亚组，优选其中所述亲本枯草杆菌蛋白酶包含与SEQ ID NO:1具有至少80%同一性的氨基酸序列。