[发明专利]乳动脉衍生细胞及在组织修复和再生中的应用方法

权利要求书

1.一种分离的哺乳动物内乳动脉衍生细胞，所述细胞能够在培养中自我更新和扩增，其中所述细胞对于细胞表面标志物HLA-1的表达呈阳性，而对于以下每一种细胞表面标志物的表达呈阴性：CD 10、CD31、CD34、CD45、CD133、CD141和KDR/Flk-1。

2.根据权利要求1所述的细胞，其中所述细胞另外对于CD29、CD44、CD73、CD166的表达呈阳性，而另外对于CD15、CD23、CD24、CD62p、CD80、CD86、CD104、CD105、CD117、CD138、CD146、VE-钙黏着蛋白和HLA-2呈阴性。

3.根据权利要求1所述的细胞，其中所述细胞能够分化成脂肪细胞、心肌细胞和内皮细胞。

4.一种分离哺乳动物内乳动脉衍生细胞的方法，所述方法包括以下步骤：

a.提供哺乳动物内乳动脉，

b.提供酶混合物，其中所述酶混合物由选自金属蛋白酶、中性蛋白酶、黏液溶解酶和它们的组合的消化酶组成，

c.将所述哺乳动物内乳动脉在所述酶混合物中温育一段时间，该段时间足以除去内膜层和从所述动脉除去外部碎片并提供部分消化的动脉，

d.将所述部分消化的动脉转移到新鲜的酶混合物中，继续消化一段时间，该段时间足以提供经消化的材料，

e.从所述经消化的材料分离所述细胞，

f.将所述细胞在包被胶原的组织培养容器上进行培养。

5.根据权利要求6所述的方法，其中所述酶混合物由胶原酶和分散酶组成。

6.根据权利要求6所述的方法，其中所述除去内膜层和从所述动脉除去外部碎片的时间为约60分钟。

7.根据权利要求6所述的方法，其中所述足以提供经消化的材料的时间在约30分钟至约60分钟的范围。

8.根据权利要求9所述的方法，其中所述足以使所述酶混合物浸透所述经消化的材料的时间为约60分钟。

9.一种细胞，通过包括以下步骤的方法从哺乳动物内乳动脉分离：

a.提供哺乳动物内乳动脉，

b.提供酶混合物，其中所述酶混合物由选自金属蛋白酶、中性蛋白酶、黏液溶解酶和它们的组合的消化酶组成，

c.将所述哺乳动物内乳动脉在所述酶混合物中温育一段时间，该段时间足以除去内膜层和从所述动脉除去外部碎片并提供部分消化的动脉，

d.将所述部分消化的动脉转移到新鲜的酶混合物中，继续消化一段时间，该段时间足以提供经消化的材料，

e.从所述经消化的材料分离所述细胞，

f.将所述细胞在包被胶原的组织培养容器上进行培养。

10.根据权利要求11所述的方法，其中所述酶混合物由胶原酶和分散酶组成。

11.根据权利要求11所述的方法，其中所述除去内膜层和从所述动脉除去外部碎片的时间为约60分钟。

12.根据权利要求11所述的方法，其中所述足以提供经消化的材料的时间在约30分钟至约60分钟的范围。

13.根据权利要求14所述的方法，其中所述足以使所述酶混合物浸透所述经消化的材料的时间为约60分钟。