[发明专利]效应子功能已消除的抗体Fc区突变体

说明书

背景技术

技术领域

本发明涉及突变的人源性抗体IgG2恒定区(Fc区)，由于突变而使其基本上失去通过Fc受体介导的表面靶抗原的交联作用来特异性结合Fcγ受体或激活免疫细胞的促有丝分裂反应的能力。本发明还提供了可复合突变的lgG2恒定区的新型抗体。

关于本领域的讨论

靶向细胞表面抗原的抗体可对免疫细胞诱发不必要的免疫刺激以及与Fc受体(FcR)结合相关的效应子功能及补体活化。由于治疗性抗体和Fc融合构建体往往需要靶向和活化或中和靶配体功能区，但又不能破坏或损害所需的局部细胞或组织，因此一直在寻求效应子功能已消除的Fc突变体。

人IgG同种型(成熟的γ球蛋白类G抗体的亚类；IgG1、IgG2、IgG3和IgG4)显示具有不同的能力来发挥免疫功能，例如抗体依赖细胞介导的细胞毒性(ADCC，例如IgG1和IgG3)、抗体依赖细胞吞噬作用(ADCP，例如IgG1、IgG2、IgG3和IgG4)，以及补体依赖细胞毒性(CDC，例如IgG1、IgG3)。此类免疫功能的同种型特异性结合是基于对不同免疫细胞上Fc受体的选择性以及结合C1q和活化膜攻击复合物(MAC)装配的能力。在各种同种型中，Fcγ受体(例如FcγRI、FcγRIIa/b/c、FcγRIIIa/b)对IgG1和IgG3的相对亲和力较高，然而对IgG2的亲和力最低(仅限于FcγRIIa 131H多态性)，IgG4只对FcγRI具有可测量的亲和力。利用序列比较分析和共结晶结构，目前已将用于受体结合的关键接触残基定位到跨越下铰链区和CH2区的氨基酸残基。自采用标准蛋白工程技术后，已在一定程度上成功增加或降低抗体制品对Fc受体和补体的C1q成分的亲和力。

在这些同种型中，IgG2与Fc受体家族的结合能力最弱。以IgG2作为起点，已试图研发出效应子功能削弱但仍保留FcRn结合能力、长期稳定性和低免疫原性的突变原。这种特性的改良型突变体不仅能提高抗体药物疗效，而且还能确保安全性。

发明内容

本发明提供了经过修饰、糖基化的免疫球蛋白恒定域的组合物，其可用于工程化改造抗体或抗体类治疗剂，例如包含Fc区并且靶向细胞表面配体的抗体或抗体类治疗剂。本发明的组合物为IgG2Fc突变体，所述突变体显示其Fcγ结合能力已削弱但仍保留FcRn结合。这些lgG Fc突变体可使治疗剂靶向可溶性抗原或细胞表面抗原，同时最大限度降低产生免疫效应子功能的Fc相关结合以及补体介导的细胞毒性。在一个方面，IgG2Fc突变体包含V234A、G237A、P238S(以EU编号系统为依据)。在另一方面，IgG2Fc突变体包含V234A、G237A、H268Q或H268A、V309L、A330S、P331S(以EU编号系统为依据)。在某一特定方面，IgG2Fc突变体包含V234A、G237A、P238S、H268A、V309L、A330S、P331S，以及任选的P233S(以EU编号系统为依据)。

在一个实施例中，IgG2Fc突变体组合物用于指示哪个位点通过与FcRn相互作用可保持治疗性抗体(或Fc融合物)的半衰期保持，同时最大限度降低或消除与免疫和效应子功能相关的Fcγ活化所产生的潜在毒性，例如i)抗体依赖性的细胞毒性(ADCC)，ii)补体依赖细胞毒性(CDC)，iii)抗体依赖细胞吞噬作用(ADCP)，iv)FcR介导的细胞活化(例如通过FcR交联作用的细胞因子释放)，以及v)FcR介导的血小板活化/减少。在一个方面，将IgG2Fc突变引入到治疗性抗体或结合物(例如多价结合物)的Fc融合物内，从而使配体靶向涉及神经障碍的细胞(例如基底细胞神经节)；涉及免疫系统紊乱的细胞(例如与B细胞或T细胞活化相关的细胞)，或靶向涉及组织修复或愈合的细胞(例如成纤维细胞或干细胞)。