[发明专利]对辛伐他汀合成表现出改善性质的LovD突变体

权利要求书

1.一种SEQ ID NO:1所示LovD多肽的变体，所述变体LovD多肽包含在下列氨基酸残基位置处的某氨基酸取代：A10；D12；K26；A86；A190；H161；K227；G275；V334；或L361。

2.如权利要求1所述的变体LovD多肽，其特征在于：

所述氨基酸取代包括在SEQ ID NO:1所示LovD多肽上氨基酸残基位置处未见的19种氨基酸中任一种；和

所述变体还包含在氨基酸残基位置C40和C60的氨基酸取代。

3.如权利要求1或2所述的变体LovD多肽，其特征在于，所述变体LovD多肽包含氨基酸取代：A10V；D12G；K26E；C40A；C60N；A86V；H161Y；A190T；K227R；G275S；V334D；V334F；和/或L361M。

4.如权利要求1或2所述的变体LovD多肽，其特征在于，所述变体LovD多肽包含以下位置的氨基酸取代：

氨基酸残基位置C40；C60；和A86；

氨基酸残基位置C40；C60；A86；和A190；

氨基酸残基位置C40；C60；D12；A86；和G275；

氨基酸残基位置C40；C60；D12；A86；C40；C60；A190；和G275；

氨基酸残基位置C40；C60；D12；K26；A86；C40；C60；H161；A190；和G275；

氨基酸残基位置C40；C60；D12；A86；A190；和G275；

氨基酸残基位置C40；C60；A10；D12；K26；A86；A190和G275；

氨基酸残基位置C40；C60；D12；K26；A86；H161；A190和G275；

氨基酸残基位置C40；C60；D12；K26；A86；H161；A190；G275；V334；和L361；或

氨基酸残基位置C40；C60；D12；K26；A86；H161；A190；G275；和V334。

5.如权利要求1或2所述的变体LovD多肽，其特征在于，所述变体LovD多肽包含氨基酸取代：

D12G，C40A，C60N，A86V，A190T和G275S；

D12G，K26E，C40A，C60N，A86V，H161Y，A190T和G275S；或

D12G，K26E，C40A，C60N，A86V，H161Y，A190T；G275S和V334F。

6.如权利要求1-5所述的变体LovD多肽，其特征在于，所述变体与SEQ ID NO:1所示LovD多肽相比显示：

聚集减少；

热稳定性改善；

催化活性改善；

k_cat/K_m值改善；

可溶表达水平改善；和/或

25°C下全细胞活性改善。

7.一种分离的多核苷酸，所述多核苷酸具有与编码权利要求1-6所述变体LovD多肽的多核苷酸至少95%的序列相同性。

8.一种包含权利要求7所述的多核苷酸的载体。

9.如权利要求8所述的载体，其特征在于，所述载体操作性连接于转化有所述载体的宿主细胞所识别的控制序列。

10.一种包含权利要求9所述的载体的宿主细胞。