[发明专利]PCSK9拮抗剂

说明书

相关申请的交叉引用

本申请要求申请日为2009年12月11日的美国临时专利申请61/285,942的优先权，并将其为了所有的目的以引用的方式并入本文。

发明领域

本发明涉及抗PCSK9的抗体拮抗剂。

发明背景

低密度脂蛋白受体(LDL-R)通过清除血液中的低密度脂蛋白(LDL)预防动脉粥样硬化和高胆固醇血症。LDL-R在翻译后水平受蛋白原转化酶枯草溶菌素/kexin型9a(subtilisin/kexin type 9a,“PCSK9”)的调节。最近，报道了小鼠中PCSK9的敲除。这些小鼠表现出血浆胆固醇水平降低了约50%，和表现出对他汀类药物(statins)在降低血浆胆固醇中增强的敏感性(Rashid S,等(2005)Proc Natl Acad Sci 102:5374-5379)。人类遗传数据也支持PCSK9在LDL体内稳态中的作用。最近，鉴定出了两个突变，其可能是PCSK9“功能丧失性”突变。具有这些突变的个体中的血浆LDL-C水平降低约40%，这转化为约50-90%的冠心病减少。总之，这些研究显示，PCSK9的抑制剂对于血浆LDL-C浓度的降低和其它由PCSK9介导的疾病是有益的，并可以，例如与用于降低胆固醇的第二药，共同用药来增强功效。

发明概述

本发明提供了与蛋白原转化酶枯草溶菌素/kexin型9(PCSK9)(例如SEQ ID NO:47)结合并拮抗其功能的抗体，和使用这样的抗体的方法，例如以治疗PCSK9介导的疾病状况。

在一个方面，本发明提供了与蛋白原转化酶枯草溶菌素/kexin型9(PCSK9)结合的抗体和抗原结合分子。在一些实施方案中，所述抗体：

a)不阻断PCSK9与低密度脂蛋白受体(LDLR)的结合，和

b)抑制PCSK9介导的LDLR降解。

在一些实施方案中，抗体或抗原结合分子与人PCSK9的第680-692位残基中的至少一个氨基酸结合。例如，在一些实施方案中，抗体或抗原结合分子与氨基酸序列RSRHLAQASQELQ(SEQ ID NO:49)中的PCSK9的表位结合。

在一些实施方案中，抗体或抗原结合分子与人PCSK9结合的平衡解离常数(KD)为约500pM或更低。例如，在一些实施方案中，抗体或抗原结合分子与人PCSK9结合的平衡解离常数(KD)为约400pM、300pM、250pM、200pM、190pM、180pM、170pM、160pM、150pM、140pM或更低。

在一些实施方案中，抗体或抗原结合分子的体内半衰期为至少约7天。在一些实施方案中，抗体或抗原结合分子的体内半衰期为至少约3、4、5、6、7、8、9、10天。在一些实施方案中，抗体或抗原结合分子的体内降胆固醇功效为至少约2周，例如2、3、4周或更长。优选，该体内半衰期是在人受试者中确定的。

在一些实施方案中，抗体包括：

(a)重链可变区，其包括人重链V片段、重链互补决定区3(CDR3)和重链构架区4(FR4)，以及

(b)轻链可变区，其包括人轻链V片段、轻链CDR3和轻链FR4，其中：

i)重链CDR3包含氨基酸序列SYYYY(A/N)MD(A/F/S/V/Y)(SEQ IDNO:14)；以及

ii)轻链CDR3可变区包含氨基酸序列LQWSSDPPT(SEQ ID NO:26)。

在一些实施方案中，抗体包括：

(a)重链可变区，其包括人重链V片段、重链互补决定区3(CDR3)和重链构架区4(FR4)，以及

(b)轻链可变区，其包括人轻链V片段、轻链CDR3和轻链FR4，其中：

i)重链CDR3包含氨基酸序列SYYYYNMDY(SEQ ID NO:12)；以及

ii)轻链CDR3可变区包含氨基酸序列LQWSSDPPT(SEQ ID NO:26)。

在一些实施方案中，抗体包括：

(a)重链可变区，其包括人重链V片段、重链互补决定区3(CDR3)和重链构架区4(FR4)，以及

(b)轻链可变区，其包括人轻链V片段、轻链CDR3和轻链FR4，其中：

i)重链CDR3包含氨基酸序列SYYYYAMDY(SEQ ID NO:13)；以及

ii)轻链CDR3可变区包含氨基酸序列LQWSSDPPT(SEQ ID NO:26)。