[发明专利]缺氧调节的条件沉默性AAV表达血管生成诱导因子

权利要求书

1.诱导或者促进患者中定向血管发生的方法，所述方法包括：

给予患者含条件沉默载体的组合物，所述载体编码以下至少一种：促血管发生因子，生长因子，细胞保护/细胞存活、细胞迁移因子和/或抗炎症因子，其中，所述因子诱导组织或者器官在所需方向上形成血管；和，

诱导或者促进定向血管发生。

2.如权利要求1所述的方法，其特征在于，所述载体包含：腺相关病毒(AAV)载体，促血管发生因子和/或生长因子和/或细胞迁移因子，启动子，缺氧反应元件(HRE)和沉默元件的组合盒。

3.如权利要求2所述的方法，其特征在于，所述载体的基因表达在有氧条件下被抑制(条件沉默)并且在局部缺血时被激活。

4.如权利要求2所的方法，其特征在于，所述条件沉默子包括NRSE，FROG，TOAD，FROG/TOAD，NRSE/FROG/TOAD或其组合。

5.如权利要求2所述的方法，其特征在于，所述条件沉默子包括至少一个SEQ ID NO：1-6所示核苷序列，衍生物，变体，突变体或者其同源物。

6.如权利要求1所述的方法，其特征在于，所述条件诱导型元件包括：缺氧反应元件(HRE)，炎症反应元件(IRE)，切应力激活元件(SSAE)，金属反应元件(MRE)或其组合。

7.如权利要求1所述的方法，其特征在于，所述载体条件性表达含以下至少一种的因子：内皮生长因子，成纤维细胞生长因子(FGF)，血小板衍生生长因子(PDGF)，胰岛素样生长因子(IGF)，表皮生长因子(EGF)，转化生长因子(TGF)，肝细胞生长因子，多育曲菌素，血管营养素，促血管生成素，血管内皮生长因子(VEGF)，转化生长因子β(TGF-β)，胰岛素样生长因子1(IGF-1)，神经生长因子(NGF)，基质衍生因子(SDF)，干细胞因子(SCF)，或红细胞生成素(EPO)。

8.一种治疗患者组织缺氧和/或炎症相关疾病和/或紊乱的方法，所述方法包括：给予患者含条件沉默载体的组合物，所述载体编码以下至少一种：促血管发生因子，生长因子，或细胞迁移因子，其中，所述因子诱导组织或者器官在所需方向上形成血管；

诱导或者促进定向血管发生；和治疗患者组织缺氧相关疾病和/或紊乱。

9.如权利要求8所述的方法，其特征在于，所述载体包括腺相关病毒

(AAV)载体或其他细胞透过性DNA或RNA载体，促血管发生因子和/或生长因子和/或细胞迁移因子，启动子，缺氧反应元件(HRE)和沉默元件的组合盒。

10.如权利要求8所述的方法，其特征在于，所述基因表达在有氧条件下被抑制(条件沉默)并且在局部缺血条件下被激活。

11.如权利要求8所述的方法，其特征在于，所述载体条件性表达以下至少一种：内皮生长因子，成纤维细胞生长因子(FGF)，血小板衍生生长因子(PDGF)，胰岛素样生长因子(IGF)，表皮生长因子(EGF)，转化生长因子(TGF)，肝细胞生长因子，多育曲菌素，血管营养素，促血管生成素，血管内皮生长因子(VEGF)，转化生长因子β(TGF-β)，胰岛素样生长因子1(IGF-1)，神经生长因子(NGF)，基质衍生因子(SDF)，干细胞因子(SCF)，或红细胞生成素(EPO)。

12.如权利要求8所述的方法，其特征在于，所述条件沉默子包括NRSE，FROG，TOAD，FROG/TOAD，或其组合。

13.如权利要求8所述的方法，其特征在于，所述条件沉默子包括至少一个SEQ ID NO：1-6所示核苷序列，衍生物，变体，突变体或其同源物。

14.如权利要求8所述的方法，其特征在于，所述条件诱导型元件包括：缺氧反应元件(HRE)，炎症反应元件(IRE)，切应力激活元件(SSAE)，金属反应元件(MRE)或其组合。

15.一种含载体的分离细胞，其中，所述载体包括：腺相关病毒(AAV)载体，促血管发生因子和/或生长因子和/或细胞迁移因子，启动子，缺氧反应元件(HRE)和沉默元件的组合盒。

16.如权利要求15所述的分离细胞，其特征在于，所述基因表达在有氧条件下被抑制(条件沉默)并且在局部缺血时被激活。