[发明专利]对急性骨髓性白血病的三特异性疗法

说明书

本发明涉及对(a)CD123；(b)CD16和(c)CD33具有结合特异性的分子。本发明进一步涉及本发明的分子，其中所述分子包括第一免疫球蛋白结构域，其包括与V_H结构域连接的V_L结构域，其中所述免疫球蛋白结构域与CD123特异性结合；第二免疫球蛋白结构域，其包括与V_H结构域连接的V_L结构域，其中所述免疫球蛋白结构域与CD16特异性结合；和第三免疫球蛋白结构域，其包括与V_H结构域连接的V_L结构域，其中所述免疫球蛋白结构域与CD33特异性结合。本发明更进一步涉及编码本发明分子的核酸分子。另外，本发明涉及本发明所述分子或所述核酸分子的诊断和药物组合物以及其在治疗急性骨髓性白血病和/或骨髓增生异常综合征中的应用。

在该说明书中，引用了包括专利申请和制造商手册在内的许多文件。这些文件的公开内容，尽管认为不与本发明的专利性相关，但是通过引用以它们的整体并入这里。更具体而言，所有参考的文件通过引用被并入的程度如同具体且单个指明每个单个文件通过引用并入一样。

急性骨髓性白血病(AML)是第二最常见的急性白血病，在美国每年约13,300新发病例和8,800的年死亡数(Jemal等，2008)。白血病的通常应用的疗法包括放射和/或化学疗法。此外，在某些情况下，骨髓移植的另外可能性被认为是合适的。但是，这些疗法对患者是相对有毒的并且通常不产生疾病的完全治愈。因此，虽然对于接受化学疗法的所有患者的65-80%可实现完全缓解(Cros等，2004，Kern和Estey 2006)，但是这些患者的大部分复发(Cros等，2004)。在常规化学疗法初始病程之后的缓解阶段中，患者骨髓中的胚细胞计数减少到总骨髓白细胞的约5%或更少，并且从化学疗法幸存的细胞被称为“最小残留病(轻微后遗症，minimal residual disease)”(MRD)细胞。这些细胞富集在AML白血病干细胞(AML-LSC)中，其尤其抗化学疗法，并且它们构成能够再扩张并造成复发的特别危险的细胞库(reservoir of cell)。对于急性骨髓性白血病，白血病干细胞已经尤其良好地得到表征(Lapidot等，1994，Bonnet和Dick 1997，Hope等，2004)。AML-LSC表达细胞表面抗原的特征集合，包括CD123、C型凝集素类分子-1(CLL-1)、CD44、CD33等等且用于AML病例CD96亚组(Jordan等，2000，Bakker等，2004，Jin等，2006，Hauswirth等，2007，Hosen等，2007，Misaghian等，2009)。这些特异细胞展示独特的生物性质，包括很少进入细胞循环、自我更新潜能和增强的对化学治疗剂和DNA损伤的抗性。因此，它们可能明显有助于最小残留病(MRD)细胞种群并且是常规治疗的AML-患者复发的原因(Ravandi和Estrov 2006)。小于60岁并且接受标准化学疗法的患者4年无病生存率仅达到约40%。此外，超过60岁的患者具有差的预后，仅具有10%至15%的4年无病生存率(Mayer等，1994，Gardin等，2007)。AML患者的这种高复发率和年老患者差的预后突出了对优先靶向AML-LSC的新疗法的急切需要。

FDA批准的用于治疗AML的药物是吉妥单抗(Gemtuzumab Ozogamicin)(GO，Mylotarg^TM，Wyeth，Madison，NJ，USA)，其是CD33特异性药物。该药剂的使用限于第一次复发超过60岁的患者并限于对标准化学疗法有抗性的患者(Bross等，2001，Sievers 2001)。GO由与细胞毒剂加里刹霉素(calicheamicin)化学偶联的人源化抗CD33 IgG抗体组成(Hamann等，2002)。在II期临床试验中，30%复发的AML患者对GO响应(Sievers 2001，Larson等，2002)。但是，发现副作用包括肝静脉闭塞性疾病、肺毒性和严重的超敏反应。此外，体外研究揭示了对CD33阴性细胞系的抗原非依赖性细胞毒性(Bross等，2001，Jedema等，2004，Schwemmlein等，2006)。