[发明专利]RON结合构建物及其使用方法

说明书

相关申请的交叉参考

本申请根据35U.S.C.§119(e)要求2009年12月29日提交的美国临时专利申请号61/290,840、2010年7月16日提交的美国临时专利申请号61/365,266、和2010年7月22日提交的美国临时专利申请号61/366,743的优先权；其全文各自通过引用纳入本文。

关于序列表的声明

本申请的相关序列表以文本格式代替纸件副本提供，由此通过引用纳入说明书。含所述序列表的文本文件名为910180_424PC_SEQUENCE_LISTING.txt。该文本文件为746KB，创建于2010年12月29日，在提交申请的同时通过EFS-Web以电子方式提交。

背景

技术领域

本发明一般涉及结合分子及其治疗应用的领域，更具体涉及含有能结合RON(recepteur d'origine Nantaise)的结合域和一个或多个其它结构域如一个或多个抗体恒定区结构域，RON在本文中也称作巨噬细胞刺激1受体或MST1 R。

背景技术

RON(recepteur d'origine Nantaise，也称作MST1R)是受体型蛋白酪氨酸激酶，为胚胎发育所必需，并在炎性应答中起重要作用(Camp等，Ann.Surg.Oncol.12:273-281(2005))。RON可在控制炎症期间对巨噬细胞的应答中起作用(Correll,P.H.等，Genes Funct.1997年2月，1(1):69-83)。RON大多在上皮衍生细胞类型中表达，并已提示RON和多种其它受体型酪氨酸激酶类似，可在恶性上皮癌的发展中起作用(Wang等，Carcinogensis 23:1291-1297(2003))。

受体型蛋白酪氨酸激酶通常由胞外结构域和胞内结构域组成，胞外结构域结合胞外配体如生长因子和激素，胞内结构域具有激酶功能域。受体型蛋白酪氨酸激酶已细分入数类，RON是受体酪氨酸激酶的MET族中的一员，该族还包括Stk、c-Met和c-Sea (Camp等，Ann.Surg.Oncol.12:273-281(2005))。RON和c-Met是人体内所见的该族的仅有成员，且它们总体上有65%的同源性。C-Met是肝细胞生长因子/分散因子(HGF/SF)的受体，并已相当充分地鉴定为原癌基因。

RON是跨膜异二聚体，包括一条源自单链前体并由数个二硫键保持在一起的链。RON的胞内部分含有激酶结构域和调控元件。胞外区域的特征为存在脑信号蛋白(sema)结构域(有数个高度保守半胱氨酸残基的约500个氨基酸的臂(stretch)，PSI(丛蛋白、脑信号蛋白、整联蛋白)结构域和4个免疫球蛋白样折叠。

还鉴定到RON的配体巨噬细胞刺激蛋白(MSP)，其与c-Met配体HGF/SF有约40%的同源性。MSP和HGF属于以联环(kringle)结构域为特征的血纤维蛋白溶酶原-凝血酶原家族。MSP也与癌症有关。例如，Welm等观察到MSP与乳腺癌的转移和预后不良之间的关联(PNAS 104:7507-7575(2007))。

受体酪氨酸激酶中只有RON和c-Met具有胞外sema结构域，且已证明RON的sema结构域包括其配体结合位点。MSP结合RON引起RON的激酶结构域内的磷酸化，这导致RON激酶活性的提高。或者，β1整联蛋白可通过Src依赖性途径磷酸化并激活RON(Camp等，Ann.Surg.Oncol.12:273-281(2005))。RON的激活启动包括PI3-K、Ras、src、β-联蛋白和Fak信号转导在内的多个途径的信号转导。RON激活的很多信号转导途径与癌症相关过程如增殖和抑制细胞凋亡有关。

RON本身也因多种原因而与癌症发展有关。例如，RON在多种人肿瘤中表达，包括乳腺癌、膀胱癌、结肠癌、卵巢癌和胰腺癌。此外，RON已显示在体外提高细胞增殖与活动力。而且，RON在RON转基因小鼠中诱导肿瘤生长和转移。(Waltz等，Cancer Research 66:11967-11974(2006))。因此，需要能抑制RON信号转导途径的分子。

发明内容