[发明专利]对瘢痕成纤维细胞生长具有抑制作用的蛋白质的应用有效
申请号: | 201110000932.2 | 申请日: | 2011-01-05 |
公开(公告)号: | CN102153642A | 公开(公告)日: | 2011-08-17 |
发明(设计)人: | 初彦辉;刘海峰;王小花;袁晓环;赵冰海;刘洁婷;郭冉;吴丹 | 申请(专利权)人: | 牡丹江医学院 |
主分类号: | C07K14/47 | 分类号: | C07K14/47;C12N15/12;C12N15/70;A61K38/17;A61P17/02 |
代理公司: | 北京鼎佳达知识产权代理事务所(普通合伙) 11348 | 代理人: | 蒋常雪 |
地址: | 157011 黑龙江省牡丹江*** | 国省代码: | 黑龙江;23 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 瘢痕 纤维 细胞 生长 具有 抑制 作用 蛋白质 应用 | ||
1.如SEQ ID NO:3所示序列的蛋白质。
2.包含如SEQ ID NO:3所示序列的蛋白质在制备抑制瘢痕成纤维细胞生长的药物中的应用。
3.权利要求2所述的应用,其中所述蛋白质的序列如SEQ ID NO:2所示。
4.权利要求2所述的应用,其中所述蛋白质的序列如SEQ ID NO:3所示。
5.权利要求2所述的应用,其中所述蛋白质是单独应用的。
6.包含如SEQ ID NO:3所示序列的蛋白质在制备抑制瘢痕形成的药物中的应用。
7.权利要求6所述的应用,其中所述蛋白质的序列如SEQ ID NO:2所示。
8.权利要求6所述的应用,其中所述蛋白质的序列如SEQ ID NO:3所示。
9.权利要求6所述的应用,其中所述蛋白质是单独应用的。
10.如SEQ ID NO:3所示序列的蛋白质的制备方法,其包括:
(1)以如SEQ ID NO:1所示的 cDNA为模板,使用引物5’-TACCATATGACGATCGCATCGC-3’和 5’-TGGGATCCTCTAGGACGTGAT-3’进行PCR扩增;
(2)PCR扩增用NdeⅠ及BamHI酶双酶切后,克隆入pET-28a载体,构建成重组载体;
(3)将上述重组载体转化入大肠杆菌表达菌株BL21(DE3)中,IPTG诱导;
(4)对表达出的目的蛋白rsRII进行包涵体纯化和复性;和
(5)将复性产物经过Ni2+-NTA柱纯化。
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