[发明专利]预测重型肝炎病情基因甲基化状态检测方法及试剂盒有效
| 申请号： | 201110001339.X | 申请日： | 2011-01-06 |
| 公开（公告）号： | CN102140535A | 公开（公告）日： | 2011-08-03 |
| 发明（设计）人： | 王凯;王丽媛;张建军;戚丽;范晓鹏;范玉琛;韩婕 | 申请（专利权）人： | 山东大学齐鲁医院 |
| 主分类号： | C12Q1/70 | 分类号： | C12Q1/70;C12Q1/68;C12R1/93 |
| 代理公司： | 济南鲁科专利代理有限公司 37214 | 代理人： | 崔民海;辛晓月 |
| 地址： | 250012 山东*** | 国省代码： | 山东;37 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 预测 重型 肝炎 病情 基因 甲基化 状态 检测 方法 试剂盒 | ||
1.预测重型肝炎病情基因甲基化状态检测试剂盒，其特征在于：盒内设有对基因组DNA进行亚硫酸氢盐修饰的试剂，针对人谷胱甘肽S-转移酶M3基因的启动子甲基化特异性和非甲基化特异性的引物对，以及2×Taq PCR MasterMix酶。
2.根据权利要求1所述的预测重型肝炎病情基因甲基化状态检测的试剂盒，其特征在于：盒内还设有外周血单个核细胞DNA提取试剂。
3.根据权利要求1所述的预测重型肝炎病情基因甲基化状态检测试剂盒，其特征在于：盒内还设有阳性对照和/或阴性对照。
4.根据权利要求1所述的预测重型肝炎病情基因甲基化状态检测试剂盒，其特征在于：盒内启动子的甲基化(M)特异性和非甲基化(U)特异性引物对选自下组为：
5.根据权利要求1所述的预测重型肝炎病情基因甲基化状态检测试剂盒，其特征在于：所述盒内设有的启动子特异性引物对的长度为15-40bp。
6.根据权利要求1所述的预测重型肝炎病情基因甲基化状态检测试剂盒，其特征在于：盒内设有的对基因组DNA进行亚硫酸氢盐修饰的试剂为亚硫酸氢盐，联苯二酚和氢氧化钠。
7.根据权利要求2所述的预测重型肝炎病情基因甲基化状态检测试剂盒，其特征在于：所述的盒内的外周血单个核细胞DNA提取试剂为磷酸盐缓冲液(PBS)，三羟甲基氨基甲烷盐酸(Tris·Cl)，乙二胺四乙酸(EDTA)，胰核糖核酸(RNA)酶，十二烷基硫酸钠(SDS)，蛋白酶K，三羟甲基氨基甲烷-饱和酚，乙酸铵，乙醇。
8.预测重型肝炎病情基因甲基化状态检测方法，其特征在于：亚硫酸氢盐修饰提取得病人外周血单个核细胞DNA后，分别用谷胱甘肽S-转移酶M3甲基化(M)特异性和非甲基化(U)特异性引物对进行甲基化特异性聚合酶链式反应，甲基化特异性聚合酶链式反应后所扩增出的扩增产物长度为130-150bp，最后检测各基因启动子甲基化状态，得出检测结果。
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