[发明专利]基于PCR的串联重复序列快速构建法和专用引物对及应用无效
申请号: | 201110001641.5 | 申请日: | 2011-01-06 |
公开(公告)号: | CN102154269A | 公开(公告)日: | 2011-08-17 |
发明(设计)人: | 陈己任;熊兴耀;邓子牛 | 申请(专利权)人: | 湖南农业大学 |
主分类号: | C12N15/11 | 分类号: | C12N15/11;C12N15/10;C12N15/113 |
代理公司: | 长沙正奇专利事务所有限责任公司 43113 | 代理人: | 何为 |
地址: | 410128 湖南*** | 国省代码: | 湖南;43 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 基于 pcr 串联 重复 序列 快速 构建 专用 引物 应用 | ||
1.一种用于扩增低拷贝方向相同的顺式作用元件的串联重复序列的引物对,其特征在于:所述引物对是根据目的顺式作用元件的序列来设计,正向引物取目的顺式作用元件序列的前20bp;反向引物由两部分组成,前半部分27个碱基取目的顺式作用元件序列的前27bp的反向互补序列,后半部分23个碱基取目的顺式作用元件序列的最后23bp的反向互补序列。
2.一种基于PCR的串联重复序列快速构建法,其特征在于:该方法是以权利要求1所述的根据目的顺式作用元件设计的引物对对目的顺式作用元件进行PCR扩增,得到方向相同的目的顺式作用元件的低拷贝串联重复序列。
3.如权利要求2所述的基于PCR的串联重复序列快速构建法,其特征在于:以权利要求1所述的根据目的顺式作用元件设计的引物对对低拷贝串联重复序列进行PCR扩增,得到方向相同的目的顺式作用元件的高拷贝串联重复序列。
4.如权利要求2或3所述的基于PCR的串联重复序列快速构建法,其特征在于:所述目的顺式作用元件是DRE顺式作用元件。
5.如权利要求4所述的基于PCR的串联重复序列快速构建法,其特征在于:所述引物对为:
正向引物:5>CAGTTTGAAAGAAAAGGGAA<3;
反向引物:
5>TCTTTTTTTCCCTTTTCTTTCAAACTGGCTTTTTGGAACTCATGTCGGTA<3。
6.权利要求1所述的引物对在构建酵母单杂交系统启动子核心重复序列中的应用。
7.如权利要求2所述的基于PCR的串联重复序列快速构建法在构建酵母单杂交系统启动子核心重复序列中的应用。
8.如权利要求3所述的基于PCR的串联重复序列快速构建法在高分子重复蛋白质生产中的应用。
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