[发明专利]双抗体夹心酶联免疫分析试剂盒及其生产方法

权利要求书

1.一种双抗体夹心酶联免疫分析试剂盒的生产方法，包括以下步骤：

(1)抗原拆分：将含有两个以上抗原表位的完整抗原拆分成两个部分，每个部分为至少包含一个完整的有效抗原表位的完全抗原；

(2)动物免疫及其检测：将上述两个完全抗原分别进行动物免疫，并采用酶联免疫分析法检测动物免疫效果，分别得到两份相应的ELISA效价不低于1∶100,000的动物免疫血清；

(3)亲和层析提取：将上述两份动物免疫血清分别通过完整抗原亲和层析方法提取出两份针对各自完全抗原的抗体；

(4)制备检测抗体和固相载体：将其中一份抗体经过生物素标记用于制备检测抗体，另一份抗体用于制备固相载体。

(5)按照双抗体夹心酶联免疫分析法要求以完整抗原为标准品组装试剂盒。

2.如权利要求1所述的生产方法，其特征在于，所述步骤(1)中完整抗原拆分的方法为：对于蛋白质抗原可以通过多肽合成、分段重组表达或蛋白酶切方法实现蛋白质抗原的拆分；对于化合物大分子抗原可以通过化学合成或化学分解实现化合物大分子抗原拆分。

3.如权利要求1或2所述的生产方法，其特征在于，所述步骤(1)中拆分后的两部分中任一部分分子量小于20kDa时，则通过添加载体制备成完全抗原后再进入步骤(2)。

4.如权利要求1或2所述的生产方法，其特征在于，所述步骤(2)中酶联免疫分析法为：以未拆分的完整抗原作为包被抗原制备固相载体，免疫血清稀释后与包被有完整抗原的固相载体共同反应，反应结束后洗涤，加抗被免疫动物的酶标抗体，底物显色，终止后读取吸光值判断抗体效价。

5.一种双抗体夹心酶联免疫分析试剂盒，其特征在于，由权利要求1-4任一项生产方法制得。