[发明专利]防治西瓜细菌性果斑病生防菌株

权利要求书

1.一种防治西瓜细菌性果斑病的生防菌株JC65，为芽孢杆菌（Bacillus sp.），2010年 12月15 日保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，菌种保藏号为CGMCC NO.4475。

2.用权利要求1所述生防菌株JC65制备的生防菌剂。

3.权利要求2所述生防菌剂在防治西瓜细菌性果斑病中的应用。

4. 权利要求1所述生防菌株JC65用于制备生防菌剂的方法，

1）将权利要求1所述生防菌株JC65接种到LB培养液中30℃培养180rpm振荡培养，12～16小时后在超净工作台中分别取样测600nm处的OD值，测定过程中以未接菌的培养液来调零；

2）当培养至OD值在0.5～0.8之间时，将种子菌液以1：100体积比加入装有发酵培养液的200L发酵罐中，30℃ 250rpm振荡培养20～24小时，发酵液pH值维持在7.0，溶氧量20%，通气量5-7 m³/小时，罐压 0.05-0.1KPa，然后6000rpm离心10min，每1000ml培养液获得13～16g湿菌，每克湿菌含4×10¹⁰～10¹⁵个菌体，取湿菌与菌体保藏液按1 g：40ml配成菌剂，成品中活菌总浓度为1×10⁹ ～1×10¹²cfu/ml。

5.根据权利要求4所述的方法，其中：

1）种子培养液LB配方：氯化钠10g/L, 胰蛋白胨10g/L, 酵母浸粉5g/L，调节pH值为7.2；

2）发酵培养液配方：麦芽糖2.5g/L, 玉米粉5 g/L, 黄豆粉5g/L, 胰蛋白胨5 g/L, 二水氯化钙 0.5 g/L，一水硫酸锰 0.5 g/L, 磷酸氢二钾1g/L，调节pH值为7.0；

3）菌体保藏液为0.01mol/L磷酸盐缓冲液，还含有浓度为0.001mol/L的Tween20非离子型表面活性剂。