[发明专利]鉴定抗阿维菌素小菜蛾种群的方法有效
| 申请号： | 201110005392.7 | 申请日： | 2011-01-12 |
| 公开（公告）号： | CN102154468A | 公开（公告）日： | 2011-08-17 |
| 发明（设计）人： | 吴青君;柳峰;梁延坡;孙礼兵;徐宝云;张友军;王少丽 | 申请（专利权）人： | 中国农业科学院蔬菜花卉研究所 |
| 主分类号： | C12Q1/68 | 分类号： | C12Q1/68 |
| 代理公司： | 北京海虹嘉诚知识产权代理有限公司 11129 | 代理人： | 胡敬红 |
| 地址： | 100081 北*** | 国省代码： | 北京;11 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 鉴定 抗阿维 菌素 小菜 种群 方法 | ||
【权利要求书】：
1.鉴定抗阿维菌素小菜蛾种群的方法，步骤如下：
(1)随机捕捉5～15头待测种群的小菜蛾，分别制备每头小菜蛾的cDNA，即10个重复的待测样品；
(2)制备小菜蛾敏感种群的cDNA，即阴性对照样品；
(3)分别以待测样品、阴性对照样品为模板，进行荧光定量PCR反应；
(4)统计计算比较待测样品与阴性对照样品的荧光定量PCR反应产物产量是否具有显著差异；
其特征在于：所述荧光定量PCR采用的引物如下：
YG-S16：CGTCTACATCCGCATCTTCC，
YG-A16CAAGATCGTCAGTCGTCCAA。
2.根据权利要求1所述的方法，所述小菜蛾敏感种群指对阿维菌素的半致死剂量为：0.05ug/ml以下。
3.根据权利要求1所述的方法，所述小菜蛾敏感种群为福建敏感种群。
4.根据权利要求1所述的方法，所述荧光PCR的反应体系如下：
cDNA 1.0ul；dNTP 2.0ul；rTaq酶0.2ul；10×Buffer 2.0ul；10uM的YG-S160.4ul；10uM的YG-A160.4ul；ddH2O至20ul；
PCR程序：95℃，5.0min；95℃0.5min，50-60℃0.5min，72℃1min，35循环；72℃10min，4℃停止。
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