[发明专利]耻垢分枝杆菌IL-17A及其制备方法

权利要求书

1.一种耻垢分枝杆菌(Mycobacterium smegmatis)IL-17A，其特征在于，表达IL-17A基因的大肠杆菌-分枝杆菌穿梭表达载体在耻垢分枝杆菌IL-17A中表达；该菌株保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏号为CGMCC NO.4446。

2.一种如权利要求1所述的耻垢分枝杆菌(Mycobacterium smegmatis)IL-17A的制备方法，其特征在于，步骤如下：

步骤1，依据IL-17 A基因序列设计扩增引物，经PCR克隆IL-17 A成熟蛋白编码基因片段；将所述IL-17 A基因片段克隆至大肠杆菌-分枝杆菌穿梭表达载体，获得重组载体；

步骤2，电转化所述重组载体至耻垢分枝杆菌，得到所述耻垢分枝杆菌IL-17A。

3.根据权利要求2所述的制备方法，其特征在于，所述设计引物过程中，使所设计的上游引物在IL-17A基因上游引入BamHⅠ酶切位点；使所设计的下游引物在IL-17A基因下游引入Hind Ⅲ酶切位点。

4.根据权利要求3所述的制备方法，其特征在于，步骤1中所述扩增引物如下：

         上游引物：5’-CAGGGATCCGCGGCTACAGTGAAGGC-3’；

         下游引物：5’-AGTAAGCTTTTAGGCTGCCTGGCGGACAAT-3’；

其中所述上游引物中GGATCC为BamHⅠ酶切位点；所述下游引物中AAGCTT为Hind Ⅲ酶切位点。

5.根据权利要求2所述的制备方法，其特征在于，步骤2中所述电转化过程，电转化仪的电击参数为电压2.5kv、电容25μF、电阻1000Ω。

6.根据权利要求2所述的制备方法，其特征在于，所述电转化后产物在卡那霉素的LBG琼脂培养基上筛选和培养。

7.一种如权利要求1所述的耻垢分枝杆菌(Mycobacterium smegmatis) IL-17A在制备增强非特异性抗感染免疫、或制备获得性免疫的药物、疫苗或免疫佐剂中的应用。

8.根据权利要求7所述的应用，其特征在于，应用于制备预防和控制因过敏性哮喘的药物、或呼吸道感染导致的哮喘气道损伤药物。

9.根据权利要求8所述的应用，其特征在于，所述哮喘气道损伤为因肺炎支原体感染导致的呼吸道炎症损伤。

10.根据权利要求7所述的应用，其特征在于，所述药物为预防和控制儿童过敏性哮喘的药物。