[发明专利]聚丙烯酰胺凝胶上一种安全环保的DNA银染方法无效
申请号: | 201110020754.X | 申请日: | 2011-01-18 |
公开(公告)号: | CN102586411A | 公开(公告)日: | 2012-07-18 |
发明(设计)人: | 金利泰;丛维涛;朱忠欣;洪国赢;李校堃 | 申请(专利权)人: | 温州安得森生物科技有限公司 |
主分类号: | C12Q1/68 | 分类号: | C12Q1/68 |
代理公司: | 暂无信息 | 代理人: | 暂无信息 |
地址: | 325035 浙江省温州市*** | 国省代码: | 浙江;33 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 聚丙烯酰胺 凝胶 一种 安全 环保 dna 方法 | ||
1.在聚丙烯酰胺凝胶上对DNA染色的方法,其为酸性银离子溶液染色法,其特征在于,使用还原性糖,以葡萄糖为代表,代替甲醛作为银离子还原剂。
2.权利要求1所述的方法,其依次包括固定步骤、第一次洗涤步骤、浸渗步骤、第二次洗涤步骤、显色步骤和终止显色反应步骤。
3.权利要求2所述的方法,其中第一次洗涤步骤是用水洗涤聚丙烯酰胺凝胶,优选洗涤时间大于等于3分钟,更优选为5-30分钟,最优选为5分钟;洗涤次数为1-6次,更优选为2-4次,最优选为3次。
4.权利要求2所述的方法,其中浸渗步骤是用含硝酸银溶液浸渗聚丙烯酰胺凝胶,优选浸渗时间为2-30分钟,更优选为5-10分钟,最优选为5分钟。
5.权利要求2所述的方法,其中第二次洗涤步骤是用水洗涤聚丙烯酰胺凝胶。
6.权利要求2所述的方法,其中显色步骤是用含还原性糖(以葡萄糖为代表)、氢氧化钠和硼酸溶液浸渗聚丙烯酰胺凝胶,优选葡萄糖的浓度为2%-10%,更优选为6%-10%,最优选为8%;优选氢氧化钠的浓度为150-300mM,更优选为200-300mM,最优选为250mM;硼酸的浓度为0-200mM,更优选为75-150mM,最优选为100mM。
7.权利要求2所述的方法,其中终止显色反应步骤是用乙二胺四乙酸钠溶液浸渗聚丙烯酰胺凝胶。
8.用于权利要求1-7之任一所述方法的试剂盒,其包括分装的含硝酸银溶液、氢氧化钠溶液、硼酸溶液的显色溶液和乙二胺四乙酸钠溶液。
9.在聚丙烯酰胺凝胶上检测DNA的方法,其包括在聚丙烯酰胺凝胶上进行电泳,然后进行权利要求1-7之任一所述方法。
10.用于权利要求9所述方法的试剂盒,其包括分装的聚丙烯酰胺凝胶电泳试剂、含硝酸银溶液、氢氧化钠溶液、硼酸溶液的显色溶液和乙二胺四乙酸钠溶液。
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