[发明专利]一种芝麻愈伤组织诱导、分化和植株再生的方法有效
申请号: | 201110022314.8 | 申请日: | 2011-01-20 |
公开(公告)号: | CN102599051A | 公开(公告)日: | 2012-07-25 |
发明(设计)人: | 张海洋;苗红梅;魏利斌;张体德;卫双玲;杜华;王永宏 | 申请(专利权)人: | 河南省农业科学院 |
主分类号: | A01H4/00 | 分类号: | A01H4/00 |
代理公司: | 中国商标专利事务所有限公司 11234 | 代理人: | 曹继红 |
地址: | 450000 *** | 国省代码: | 河南;41 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 芝麻 组织 诱导 分化 植株 再生 方法 | ||
1.一种芝麻愈伤组织诱导、分化和植株再生的方法,其特征在于,通过以下步骤实现:
A、外植体获得及预培养
选取在大田生长的开花后12-19天芝麻蒴果,先用70%酒精处理,再用3%次氯酸钠处理,然后用无菌水冲洗,之后在显微镜下剥取发育正常的芝麻幼胚,接种于幼胚生长培养基上,作为外植体预培养1周;培养条件为:温度25±2℃,光照强度3000-5000lx,光照/黑暗时间为16h/8h;培养基由MS培养基、30g/L蔗糖、8g/L琼脂粉组成;
B、愈伤组织的诱导及分化
将以上预培养后的芝麻外植体放在愈伤组织诱导培养基上培养,一周后,可以看到在外植体伤口处长出愈伤;培养三周,愈伤组织变紧表层有茎芽小突起,一个月后愈伤组织上有绿芽点长出;诱导培养基由MS培养基、0.1mg/L萘乙酸、2mg/L6-苄基嘌呤、30g/L蔗糖、8g/L琼脂粉组成;
C、再生植株的获得
等到绿芽点继续发育成大的绿色不定芽及芽丛时,切取丛生芽放于芽增殖培养基上培养,两周后绿芽长出短轴茎而形成苗;增殖培养基由1/2MS培养基、30g/L蔗糖、8g/L琼脂粉组成;
以上所有组培养基灭菌前调pH值,灭菌后pH值处于5.6-5.9之间。
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