[发明专利]丙型肝炎病毒检测试剂盒无效
申请号: | 201110025289.9 | 申请日: | 2011-02-06 |
公开(公告)号: | CN102140538A | 公开(公告)日: | 2011-08-03 |
发明(设计)人: | 刘永生;张杰;陈豪泰;马丽娜;周建华;丁耀忠 | 申请(专利权)人: | 中国农业科学院兰州兽医研究所 |
主分类号: | C12Q1/70 | 分类号: | C12Q1/70;C12Q1/68 |
代理公司: | 兰州振华专利代理有限责任公司 62102 | 代理人: | 张晋 |
地址: | 730046 甘肃*** | 国省代码: | 甘肃;62 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 肝炎 病毒 检测 试剂盒 | ||
1.一种人丙型肝炎病毒快速检测试剂盒,其特征在于试剂盒中有四条特异性引物,这四条特异引物为:外侧引物:
上游F:5-GGTGAGTACACCGGAATTGC-3,
下游B:5-CACGGTCTACGAGACCTCC-3;
内测引物:
FIP:5-GGCACGCCCAAATCTCCAGGTTTTAGGACGACCGGGTCCTT-3,
BIP:5-GCGAGACTGCTAGCCGAGTTTTTCCCTAT CAGGCAGTACCACA-3。
2.权利要求1所述的人丙型肝炎病毒快速检测试剂盒的使用方法,其特征是以从被检试样中提取的RNA为模板,在其中加入特异性引物、聚合酶、缓冲液及水后进行LAMP反应,反应产物加入溴化乙锭后在紫外灯下观察,根据反应产物有在紫外光下是否产生荧光确定被检样品是否带有丙型肝炎病毒。
3.权利要求1所述的人丙型肝炎病毒快速检测试剂盒的使用方法,其特征是以从被检试样中撮的RNA为模板,在其中加入特异性引物、聚合酶、缓冲液及水后进行LAMP反应,将反应产物进行琼脂凝胶电泳,根据反应产物是否在特定泳道出现条带确定被检样品是否带有丙型肝炎病毒。
4.权利要求2或3所述的人丙型肝炎病毒快速检测试剂盒的使用方法,其特征是在50μL反应体系中加入:被检RNA 2μL,10μmol/L的外侧上下游引物各1μL,1μmol/L的内侧上下游引物各1μL,2.5mmol/L的dNTP 2μL,Bst聚合酶8U,10x缓冲液5μL,加大的H2O至50μL。LAMP反应程序如下:64℃60min,然后80℃5min。
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