[发明专利]具有脑靶向递药特性的多肽及其制备方法

说明书

技术领域

本发明属于蛋白质多肽技术领域，涉及具有脑靶向递药特性的多肽，包括所述肽的分子结构及其在制备脑靶向递药中的应用。

背景技术

随着人类社会的老龄化，脑部疾病的发病率正呈逐年上升的趋势，正严重危害着人类的生命和健康。通常脑部疾病包括中枢神经系统疾病（帕金森病、老年性痴呆）、脑肿瘤、脑血管病变、脑部病毒和细菌感染等疾病。

现有技术公开了血脑屏障（BBB）是存在于血液与脑组织间的屏障系统，它能将脑组织非必需或是有害的物质隔离在外，起到保护脑组织的作用。血脑屏障上的脑毛细血管内皮细胞和胶质细胞共同构成了紧密连接，即是一道BBB的机械屏障。研究显示，脑毛细血管内皮细胞膜上还存在一些特殊的酶系统，能使某些药物降解，如多巴胺脱羧酶能使L-多巴和L-5-羟色胺酸脱羧生成不易透过BBB的L-多巴胺和L-5-羟色胺，从而构成BBB的酶屏障；脑毛细血管内皮细胞膜上的P-糖蛋白等还起着外排泵的作用，它能选择性地将脑内有害物质或过剩物质泵出脑外，限制物质的脑内递送。血脑屏障的上述功能维持了正常生理状态下脑组织内环境的恒定，但在疾病治疗过程中却限制了药物的透过。据有关统计，目前临床常规制剂给药后，大约有98%的化学药物和几乎100%的蛋白多肽或基因药物由于血脑屏障的作用而难以入脑，很大程度上限制了脑部疾病的治疗。因此，增加药物尤其是蛋白多肽药物的脑内递释技术研究已成为药剂学及其交叉学科的研究热点。

目前，在增加药物透过血脑屏障的策略中，受体介导胞吞转运入脑的纳米递释系统最受关注。脑毛细血管内皮细胞膜上存在多种特异性受体，如转铁蛋白受体、胰岛素受体、低密度脂蛋白受体等。受体介导胞吞转运就是利用这些受体与相应配体或单克隆抗体的特异性结合，使得载药系统（如纳米粒，脂质体等）能够以胞吞的方式介导相应的药物入脑。其中研究较多的介导入脑的靶向功能基有：转铁蛋白、胰岛素和单抗OX26等，它们均能介导纳米载药系统跨越血脑屏障，但仍存在某些不足，如：转铁蛋白受体可能会被内源性转铁蛋白饱和；胰岛素的体内半衰期非常短，并且可能引起低血糖；OX26的免疫原性和动物种属选择性较强，应用到人体需采用抗人转铁蛋白受体单抗，制备技术较为复杂等等。因此，探寻新型的脑靶向功能基，构建更为合理、有效的脑靶向递释系统具有很高的研究价值和临床意义。

现有技术公开了噬菌体展示肽库技术是一种筛选功能性多肽的生物技术，它将随机多肽文库表达于丝状噬菌体的表面，通过多轮的“亲和－洗脱－扩增”步骤，实现高通量亲和筛选。有研究通过噬菌体展示技术筛选出与内皮细胞特异性结合的多肽，其中最具代表性的是可与肿瘤血管内皮细胞特异结合的精氨酸-甘氨酸-天冬氨酸（RGD）三肽序列，RGD结合的长循环纳米载药系统表现出良好的肿瘤靶向性。Pasqualini等获得一种与肺细胞特异性结合的肽，通过与抗腺病毒抗体连接而靶向于细胞膜上二肽酶的递药系统。Wan Xiaomei等也获得一种能经鼻腔嗅粘膜入脑的七肽序列。研究显示，经噬菌体展示筛选获得的多肽亲和力高、特异性强、安全性好、生物降解和生物相容性优良、合成方便，并易于在末端进行修饰。

与本发明相关的现有技术还有：Ito，et al. The effect of RGD peptide-conjugated magnetite cationic liposomes on cell growth and cell sheet harvesting. Biomaterials, 2005，26: 6185；Trepel M，et al. Molecular adaptors for vascular-targeted adenoviral gene delivery. Hum Gene Ther, 2000，11:1971；Xiao-Mei Wan et al. Identification of nose-to-brain homing peptide through phage display. Peptides, 2009，30:343。

但目前为止，尚未见通过噬菌体展示技术筛选经静脉注射入脑的靶向功能基的相关研究和报道。

发明内容

本发明的目的是提供与血脑屏障具有亲和性的相关多肽，并提供该相关多肽的分子结构。

本发明的另一目的是提供上述相关多肽在构建脑靶向递药系统中的用途。

本发明的目的通过下述技术方案予以实现：