[发明专利]一种微生物复合发酵菌剂及其制备方法和应用

权利要求书

1.一种微生物复合发酵菌剂，其特征在于：所述的复合发酵菌剂的活性组分为热带假丝酵母(G.tropicalis)保藏号为CGMCC NO.4201和乳酸乳球菌(Lactococcus lactis)保藏号为CGMCC NO.4202，所述的热带假丝酵母菌液和所述的乳酸乳球菌菌液按质量比为0.5-2∶1的比例混合。

2.根据权利要求1所述的一种微生物复合发酵菌剂，其特征在于：所述的热带假丝酵母和所述的乳酸乳球菌的菌种按质量比为1∶1的比例混合。

3.根据权利要求1所述的一种微生物复合发酵菌剂，其特征在于：所述的复合发酵菌剂的活性组分还包括腐败希瓦氏菌(Shewanella putrefacens)，所述的腐败希瓦氏菌的质量占所述的复合发酵菌剂质量的20％-30％。

4.一种制备权利要求1所述的微生物复合发酵菌剂的方法，其特征在于包括以下步骤：

(1)斜面菌种培养：将热带假丝酵母(G.tropicalis)保藏号为CGMCCNO.4201、乳酸乳球菌(Lactococcus lactis)保藏号为CGMCC NO.4202分别接于相应的斜面培养基上，在pH为5.8-6.8，温度为26-30℃的条件下静置培养24-48小时，放入4℃冰箱保存；

(2)液体种子扩大培养分别挑取2至3环斜面菌种培养后得到的热带假丝酵母和乳酸乳球菌于相应的液体培养基中，在26-30℃的条件下摇床培养24-48小时，进行液体种子扩大培养，得到带假丝酵母菌液和乳酸乳球菌菌液；

(3)固体种子扩大培养将热带假丝酵母菌液和乳酸乳球菌菌液按质量比0.5-2∶1的比例混合均匀，制成复合菌液，将所述的复合菌液按质量体积百分比4-5％的接种量将其接入到固体扩大培养基中，在温度为25-35℃的条件下，培养时间为24-48小时，得到复合发酵菌剂。

5.根据权利要求4所述的一种微生物复合发酵菌剂的制备方法，其特征在于步骤(1)中热带假丝酵母的斜面培养基的配制方法为：称取200g去皮马铃薯，加入1000mL蒸馏水煮沸20min，纱布过滤后补加蒸馏水至1000mL，再加入葡萄糖或蔗糖20g、琼脂15-20g后，0.1MPa灭菌15-20min备用。

6.根据权利要求4所述的一种微生物复合发酵菌剂的制备方法，其特征在于步骤(1)中乳酸乳球菌的斜面培养基的配制方法为：将如下成分蛋白胨10g、、牛肉膏10g、酵母膏5g、柠檬酸二铵2g、磷酸氢二钾2g、乙酸钠5g、蒸馏水1000mL混合后加热溶解，冷却至50℃，用NaOH调pH值至6.2-6.4，再加入以下成分：MgSO₄0.58g、MnSO₄0.25g、葡萄糖15g、吐温-801mL，琼脂15-20g后，0.07MPa灭菌20min备用。

7.根据权利要求4所述的一种微生物复合发酵菌剂的制备方法，其特征在于步骤(2)中热带假丝酵母的液体培养基的配制方法为：称取200g去皮马铃薯，加入1000mL蒸馏水煮沸20min，纱布过滤后补加蒸馏水至1000mL，再加入葡萄糖或蔗糖20g，0.1MPa灭菌15-20min备用。

8.根据权利要求4所述的一种微生物复合发酵菌剂的制备方法，其特征在于步骤(2)中乳酸乳球菌的液体培养基的配制方法为：将如下成分蛋白胨10g、、牛肉膏10g、酵母膏5g、柠檬酸二铵2g、磷酸氢二钾2g、乙酸钠5g、蒸馏水1000mL混合后加热溶解，冷却至50℃，用NaOH调pH值至6.2-6.4，再加入以下成分：MgSO₄0.58g、MnSO₄0.25g、葡萄糖15g、吐温-801mL，0.07MPa灭菌20min备用。

9.根据权利要求4所述的一种复合发酵菌剂的制备方法，其特征在于步骤(3)中固体扩大培养基的配制方法为：以麦麸为基准，按质量百分比添加10-15％的玉米粉，加水搅拌均匀，得到水分含量为50-60％的固体扩大培养基。

10.根据权利要求1-9中任一项所述的微生物复合发酵菌剂的应用，其特征在于：所述的微生物复合发酵菌剂按质量百分比5％-6％的接种量添加于餐厨垃圾中用于微生物发酵。