[发明专利]一种微生物复合发酵菌剂及其制备方法和应用

说明书

技术领域

本发明涉及一种复合发酵菌剂及其制备方法，尤其是涉及一种用于餐厨垃圾处理的微生物复合发酵菌剂及其制备方法和应用。

背景技术

餐厨垃圾是指家庭、学校、机关公共食堂以及餐饮行业等的食物废料和食物残余，是城市生活垃圾的主要组成部分。餐厨垃圾主要包括米和面粉类食物残余、蔬菜、植物油、动物油等，从化学组成上，有淀粉、纤维素、蛋白质、脂类和无机盐等，其特点如下：1、粗蛋白和粗纤维等有机物含量高，开发利用价值较大，但易腐并产生恶臭；2、含水量高，不便收集运输，处理不当容易产生二次污染；3、油类和盐类物质含量较其它生活垃圾高，对资源化产品品质影响较大，需要很大处理成本，用微生物对餐厨垃圾进行发酵处理制成发酵产品能很好的解决上述存在的问题。

现有的用于餐厨垃圾处理的发酵菌种，大多采用霉菌和酵母菌，制备得到的蛋白饲料适口性好、有利于消化，对猪和人体并无明显威胁，但是由于霉菌、酵母菌适宜生长的PH值为6.5-7，有利于餐厨垃圾中腐败菌的生长及病原微生物的繁殖，容易导致餐厨垃圾的变质发臭，同时降低了餐厨垃圾中的蛋白含量。

发明内容

本发明所要解决的技术问题是提供一种能抑制餐厨垃圾中腐败菌的生长及病原微生物的繁殖，减少餐厨垃圾的变质发臭，同时提高餐厨垃圾中蛋白含量的微生物复合发酵菌剂及其制备方法和应用。

本发明解决上述技术问题所采用的技术方案为：一种微生物复合发酵菌剂， 所述的复合发酵菌剂的活性组分为热带假丝酵母(G.tropicalis)保藏号为CGMCCNO.4201和乳酸乳球菌(Lactococcus lactis)保藏号为CGMCC NO.4202，所述的热带假丝酵母菌液和所述的乳酸乳球菌菌液按质量比为0.5-2∶1的比例混合。

所述的热带假丝酵母和所述的乳酸乳球菌的菌种按质量比为1∶1的比例混合。

所述的复合发酵菌剂的活性组分还包括腐败希瓦氏菌(Shewanella putrefacens)，所述的腐败希瓦氏菌的质量占所述的复合发酵菌剂质量的20％-30％。

一种微生物复合发酵菌剂的制备方法，包括以下步骤：

(1)斜面菌种培养：将热带假丝酵母(G.tropicalis)保藏号为CGMCCNO.4201、乳酸乳球菌(Lactococcus lactis)保藏号为CGMCC NO.4202分别接于相应的斜面培养基上，在pH为5.8-6.8，温度为26-30℃的条件下静置培养24-48小时，放入4℃冰箱保存；

(2)液体种子扩大培养分别挑取2至3环斜面菌种培养后得到的热带假丝酵母和乳酸乳球菌于相应的液体培养基中，在26-30℃的条件下摇床培养24-48小时，进行液体种子扩大培养，得到带假丝酵母菌液和乳酸乳球菌菌液；

(3)固体种子扩大培养将热带假丝酵母菌液和乳酸乳球菌菌液按质量比0.5-2∶1的比例混合均匀，制成复合菌液，将所述的复合菌液按质量体积百分比4-5％的接种量将其接入到固体扩大培养基中，在温度为25-35℃的条件下，培养时间为24-48小时，得到复合发酵菌剂。

步骤(1)中热带假丝酵母的斜面培养基的配制方法为：称取200g去皮马铃薯，加入1000mL蒸馏水煮沸20min，纱布过滤后补加蒸馏水至1000mL，再加入葡萄糖或蔗糖20g、琼脂15-20g后，0.1MPa灭菌15-20min备用。

步骤(1)中乳酸乳球菌的斜面培养基的配制方法为：将如下成分蛋白胨10g、、牛肉膏10g、酵母膏5g、柠檬酸二铵2g、磷酸氢二钾2g、乙酸钠5g、蒸馏水1000mL混合后加热溶解，冷却至50℃，用NaOH调pH值至6.2-6.4，再加入以下成分：MgSO₄0.58g、MnSO₄0.25g、葡萄糖15g、吐温-801mL，琼脂15-20g后，0.07MPa灭菌20min备用。

步骤(2)中热带假丝酵母的液体培养基的配制方法为：称取200g去皮马铃薯，加入1000mL蒸馏水煮沸20min，纱布过滤后补加蒸馏水至1000mL，再加入葡萄糖或蔗糖20g，0.1MPa灭菌15-20min备用。