[发明专利]饭豆柠檬酸转运子基因VuMATE及其应用无效
申请号: | 201110032700.5 | 申请日: | 2011-01-30 |
公开(公告)号: | CN102154318A | 公开(公告)日: | 2011-08-17 |
发明(设计)人: | 郑绍建;杨建立;杨晓颖 | 申请(专利权)人: | 浙江大学 |
主分类号: | C12N15/29 | 分类号: | C12N15/29;C12N15/63;A01H4/00;A01H5/00 |
代理公司: | 杭州中成专利事务所有限公司 33212 | 代理人: | 金祺 |
地址: | 310027 浙*** | 国省代码: | 浙江;33 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 柠檬酸 转运 基因 vumate 及其 应用 | ||
1. 饭豆柠檬酸转运子基因VuMATE,其特征是:具有SEQ ID NO:1所述的核苷酸序列。
2. 一种耐铝性的转基因农作物的培育方法,其特征是包括以下步骤:
1)、选用具有SEQ ID NO:1所述核苷酸序列的饭豆柠檬酸转运子基因VuMATE;
2)、组成型表达转基因载体的构建:
在双元载体pCAMBIA2300的多克隆位点,利用酶切连接方法插入花椰菜花叶病毒组成型启动子CaMV35S、绿色荧光蛋白GFP和梨核酮糖-1,5-二磷酸羧化酶/加氧酶基因终止子nos的正向串联子,得到改造的pCAMBIA2300载体;在上述改造的pCAMBIA2300载体的CaMV35S启动子和GFP之间利用酶切连接的方法正向插入饭豆柠檬酸转运子基因VuMATE,得到过量表达VuMATE的转基因载体pRBM;
3)、转基因农作物的培育:
将转化了上述pRBM载体的农杆菌EHA105侵染番茄Micro-Tom的叶盘,经过转基因的共培养、选择、分化和生根步骤,获得转基因番茄MATE-2。
3. 根据权利要求2所述的耐铝性的转基因农作物的培育方法,其特征是:所述步骤3)中的选择为卡那霉素抗性筛选。
4. 如权利要求1所述饭豆柠檬酸转运子基因VuMATE的用途,其特征是:用于植物转基因,从而提高农作物的耐铝性。
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