[发明专利]一种心可舒制剂指纹图谱的测定方法

说明书

技术领域

本发明涉及以天然植物药材原料制成的心可舒制剂HPLC指纹图谱的构建方法，以及由此法所得到的心可舒制剂HPLC标准指纹图谱。

背景技术

心可舒制剂是由多种天然中药材经精工制作而成的中药复方制剂，现已证明其含有多种生物活性物质。主要成分包括丹参、葛根、三七、木香、山楂。

药理及动物实验证实：心可舒制剂具有活血化瘀，行气止痛之功能，达到增加冠脉流量，改善心肌的供血、供氧，改善左室做功，使心脏的“泵”功能加强而起到显著的治疗作用。冠心病心绞痛的基本病理过程是在冠状动脉痉挛，粥样硬化的基础上发生心肌氧代谢供需失调，供血不足，耗氧量增加是缺血性心脏病的主要因素。理想而有效的治疗药物是以增加冠状动脉血流量的同时又降低心肌耗氧量，在某些状态下降低心肌耗氧尤为重要。而心可舒制剂不但具有以上治疗特性，并对改善心肌的营养状态，增强心肌抗缺血能力，以及对由垂体后叶素引起的心肌缺血有明显的保护作用。通过临床观察治疗结果证实，心可舒制剂治疗冠心病疗效显著，对冠心病心绞痛缩短疗效时间，迅速缓解症状、病情，减轻患者痛苦和经济负担，提高生活质量起到其他抗冠心病心绞痛类药物无法比拟和替代的良好作用。

心可舒制剂对心血管病具有标本兼治的独特作用，重在治本，因此远期疗效尤为突出，随用药持续时间的延长，疗效越加显著，无明显不良反应。对老年慢性病，如糖尿病，高血脂、哮喘及外周血管病变患者无禁忌。心可舒制剂比β受体阻滞剂更适宜冠心病患者长期治疗，克服β受体阻滞剂用药过程中需慎重调整剂量的麻烦，所以是慢性患者长期治疗的新一代广谱高效的血管类药物。

自心可舒制剂上市以来，因其治疗效果好，见效快，价格便宜，受到了广大患者的好评。

随着科技不断创新和发展，发明人又对心可舒制剂做了更加深入的研究，为提高测定心可舒制剂的有效成分及其含量的准确性，本发明提供一种检测更加准确、操作更加便捷、快速的心可舒制剂HPLC指纹图谱的测定方法。

发明内容

本发明的目的在于提供一种心可舒制剂HPLC指纹图谱的测定方法，通过此测定方法，可控制心可舒制剂质量；本发明所述的心可舒制剂可以为：片剂、胶囊剂、颗粒剂、丸剂等所有口服制剂。

指纹图谱是将供试品和对照品的标准图谱相对照的技术，包括标准图谱的建立和供试品实际测定技术。

本发明的心可舒制剂HPLC指纹图谱的比较测定方法如下：

(1)心可舒制剂供试品溶液的制备：称取本品研燥细粉(液体制剂真空干燥后研细粉)，精密称取0.1g置10ml量瓶中，精密加入70％(v/v)的甲醇5ml，密塞，称定重量，超声处理20分钟，静置放冷，称重，70％甲醇补足减失的重量，离心10min，取上清液，过0.45μm滤膜，即得。

(2)对照品溶液的制备：精密称取原儿茶醛、葛根素、大豆苷、大豆苷元、丹酚酸B适量，加甲醇使溶解，精密称取丹参素钠适量，加30％甲醇使溶解，分别制成对照品溶液；原儿茶醛、葛根素、大豆苷、大豆苷元、丹酚酸B、丹参素钠分别为：原儿茶醛为21μg/ml，葛根素为79μg/ml，大豆苷为50μg/ml，大豆苷元为50μg/ml，丹酚酸B为130μg/ml，丹参素钠为70μg/ml。

(3)心可舒制剂中成分的定性定量测定：分别精密吸取对照品溶液和供试品溶液各10μl，进样，用高效液相色谱仪测定，得到色谱图，以对照品的色谱峰相对保留时间和峰面积为1，计算供试品的相对保留时间和相对峰面积；以定性定量，同时比较供试品的指纹图谱，对照品的指纹图谱和标准指纹图谱；

其中所述高效液相色谱仪中的色谱柱，用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；流动相：乙腈:磷酸水。磷酸水(％)92～10：乙腈(％)8～90；线性梯度洗脱；T(min)：0～120；柱温10～50℃；检测波长278nm；

其中所述标准指纹图谱用以下方法建立，取10批心可舒制剂的，分别按上述供试品溶液的制备方法制得供试品溶液，根据检测所得的10批检测数据，采用《中药色谱指纹图谱相似度评价系统2004A》进行评价，在278nm检测波长下的相似度大于0.9的图谱为标准指纹图谱；

其中所述标准指纹图谱在278nm检测波长下的指纹图谱具有14个特征峰，其中归属山楂的有2个特征峰；归属丹参的有3个特征峰；归属葛根的有7个特征峰；4号峰为丹参素，5号峰为原儿茶醛，7号峰为葛根素，11号峰为大豆苷，12号峰为丹酚酸B，13号峰为大豆苷元；