[发明专利]用于检测津优35号黄瓜杂交种子纯度的引物序列及检测方法

权利要求书

1.用于检测津优35号黄瓜杂交种子纯度的引物序列，其特征是它由上游引物和下游引物组成，所述上游引物是序列表中SEQ ID NO.1所述的核苷酸序列，所述下游引物是序列表中SEQID NO.2所述的核苷酸序列。

2.检测津优35号黄瓜杂交种子纯度的方法，其特征是包括如下步骤：

(1)提取津优35号黄瓜杂交种子基因组DNA；

(2)进行PCR扩增：在PCR扩增专用薄壁管中加入津优35号黄瓜杂交种子基因组DNA10～20ng，再加入序列表中SEQ ID NO.1所述的核苷酸序列15～30ng、序列表中SEQ ID NO.2所述的核苷酸序列15～30ng、1倍的含Mg²⁺的PCR缓冲液、dNTP 2mmol、Taq DNA聚合酶0.5～1单位，加无菌重蒸馏水至10μl；将PCR扩增专用薄壁管放入PCR仪中扩增，扩增条件为：94℃预变性180秒；94℃变性30秒，50-55℃退火30秒，72℃延伸60秒，30个循环；再72℃延伸7min，扩增完成；

(3)PCR扩增产物的凝胶电泳分析：将扩增产物采用6％变性聚丙烯酰胺凝胶进行电泳分离；在扩增产物中加入变性凝胶上样缓冲液，上样于经30分钟预电泳的变性聚丙烯胺凝胶上，70W恒功率电泳至溴酚兰刚刚到达凝胶的另一端，凝胶经硝酸银染色后在可见光下观察、照相；

(4)依据被鉴定样品在凝胶上条带的相对位置，检测津优35号黄瓜杂交种子纯度。