[发明专利]存活素酶联免疫试剂盒及其应用有效
申请号: | 201110034400.0 | 申请日: | 2011-02-01 |
公开(公告)号: | CN102181401A | 公开(公告)日: | 2011-09-14 |
发明(设计)人: | 张青云 | 申请(专利权)人: | 北京市肿瘤防治研究所 |
主分类号: | C12N5/20 | 分类号: | C12N5/20;C07K16/18;G01N33/577;G01N33/574 |
代理公司: | 北京路浩知识产权代理有限公司 11002 | 代理人: | 王加岭;张庆敏 |
地址: | 100142 北京市海*** | 国省代码: | 北京;11 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 存活 素酶联 免疫 试剂盒 及其 应用 | ||
1.一种杂交瘤细胞株BCHJYS10,其保藏号为CGMCC No.4574。
2.由权利要求1所述的杂交瘤细胞株产生的存活素单克隆抗体。
3.含有权利要求2所述的单克隆抗体或生物素标记的权利要求2所述的单克隆抗体的存活素酶联免疫试剂盒。
4.根据权利要求3所述的试剂盒,其特征在于,还包括酶标板、存活素标准品、酶标二抗或酶标亲和素、存活素多克隆抗体或生物素标记的多克隆抗体、底物显色液、终止液、洗涤液、稀释液;其中,包被酶标板所用的缓冲液为0.02~0.05mol/L的碳酸缓冲液,pH值为9.1~9.9;所用的封闭液为含有1~100mg/ml脱脂奶粉的PBS溶液。
5.根据权利要求4所述的试剂盒,其特征在于,所述的存活素单克隆抗体和多克隆抗体的浓度为0.1~20μg/ml;所述的生物素标记的存活素单克隆抗体和多克隆抗体的浓度为0.1~20μg/ml。
6.根据权利要求4或5所述的试剂盒,其特征在于,当存活素单抗作为包被抗体时,存活素多抗或生物素标记的存活素多抗作为捕获抗体;当存活素多抗作为包被抗体时,存活素单抗或生物素标记的存活素单抗作为捕获抗体。
7.根据权利要求6所述的试剂盒,其特征在于,当捕获抗体为存活素单克隆抗体或多克隆抗体时含有酶标二抗;当捕获抗体为生物素标记的存活素单克隆抗体或多克隆抗体时含有酶标亲和素。
8.根据权利要求4或5所述的试剂盒,其特征在于,所述的稀释液为含有质量体积比1~100mg/ml脱脂奶粉和体积比为0.05%Tween-20的PBS溶液或生理盐水溶液;所述的洗涤液为含有体积比为0.05%Tween-20的PBS溶液;所述的存活素的标准蛋白浓度分别为0ng/ml,0.0625ng/ml,0.125ng/ml,0.25ng/ml,0.5ng/ml,1.0ng/ml,2.0ng/ml,4.0ng/ml;所述的终止液为体积比为12.5%的硫酸。
9.根据权利要求4或5所述的试剂盒,其特征在于,当所述的酶标二抗或酶标亲和素的酶为辣根过氧化物酶时,显色液为含有四甲基联苯胺的pH为1~9的柠檬酸-磷酸缓冲液。
10.一种检测样本中含有存活素蛋白方法,包括步骤:
(1)样品的处理;
(2)用权利要求的3-9任一所述的试剂盒进行检测;
(3)分析检测结果。
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