[发明专利]产谷氨酰胺转氨酶的基因工程菌及其构建方法无效
| 申请号： | 201110034957.4 | 申请日： | 2011-02-09 |
| 公开（公告）号： | CN102174456A | 公开（公告）日： | 2011-09-07 |
| 发明（设计）人： | 路福平;刘逸寒;刘凯;王春霞;王建玲 | 申请（专利权）人： | 天津科技大学 |
| 主分类号： | C12N1/21 | 分类号： | C12N1/21;C12N15/75;C12R1/125 |
| 代理公司： | 天津盛理知识产权代理有限公司 12209 | 代理人： | 王来佳 |
| 地址： | 300457 天津市*** | 国省代码： | 天津;12 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 谷氨酰胺 转氨酶 基因工程 及其 构建 方法 | ||
1.一种产谷氨酰胺转氨酶的基因工程菌，其特征在于：宿主菌为枯草芽孢杆菌，包含重组质粒pWB980-tg。
2.根据权利要求1所述的产谷氨酰胺转氨酶的基因工程菌，其特征在于：所述重组质粒pWB980-tg中的tg大小为谷氨酰胺转氨酶基因大小为738bp，其序列为序列3。
3.根据权利要求1所述的产谷氨酰胺转氨酶的基因工程菌，其特征在于：所述重组质粒pWB980-tg中的tg的来源为枯草芽孢杆菌。
4.根据权利要求1所述的产谷氨酰胺转氨酶的基因工程菌，其特征在于：所述重组质粒pWB980-tg具有表达该基因所需的控制元件，含有一个启动子和一个终止子，在启动子和终止子之间有一段多克隆位点，这些多克隆位点分别包含有若干单一酶切位点。
5.一种产谷氨酰胺转氨酶的基因工程菌的构建方法，其特征在于：构建方法包括如下步骤：
(1)根据GenBank中已报道的枯草芽孢杆菌谷氨酰胺转氨酶基因为依据，设计引物，引物序列为序列1和序列2，利用PCR得到谷氨酰胺转氨酶基因tg；
(2)表达载体的构建：将步骤(1)得到的目的基因酶切后与表达载体pWB980连接，鉴定正确后，获得重组质粒为pWB980-tg；
(3)转化和表达：重组质粒pWB980-tg转化表达宿主枯草芽孢杆菌中，构建基因工程菌，鉴定正确后即为产谷氨酰胺转氨酶的基因工程菌。
6.根据权利要求5所述的产谷氨酰胺转氨酶的基因工程菌的构建方法，其特征在于：所述表达载体pWB980来源于携带质粒pWB980的枯草芽孢杆菌菌株。
7.根据权利要求5所述的产谷氨酰胺转氨酶的基因工程菌的构建方法，其特征在于：所述重组质粒pWB980-tg中的tg大小为谷氨酰胺转氨酶基因大小为738bp，其序列为序列3。
8.根据权利要求5所述的产谷氨酰胺转氨酶的基因工程菌的构建方法，其特征在于：所述表达载体pWB980-tg中的tg的来源为枯草芽孢杆菌。
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