[发明专利]用于检测水稻白叶枯病菌的引物、方法以及试剂盒

权利要求书

1.一种用于检测水稻白叶枯病菌菌株GD414的引物，该引物的上游引物核苷酸序列为SEQ ID NO：4，下游引物核苷酸序列为SEQ ID NO：3。

2.一种用于检测水稻白叶枯病菌菌株GD414的方法，该方法包括以下步骤：

(1)挑取待测菌株菌落或提取待测菌株基因组DNA作为PCR扩增模板，采用根据权利要求1所述的引物进行PCR扩增；

(2)对PCR扩增的产物进行琼脂糖凝胶电泳分析。

3.根据权利要求2所述的方法，其特征在于，所述PCR扩增的反应体系为20μl反应体系，包括：10×PCR缓冲液2μL，dNTP(各2.5mM)1μL，引物(10μM)各1μL，Taq酶1U，待测菌株基因组DNA 10ng，补ddH2O至反应总体积为20μL。

4.根据权利要求2所述的方法，其特征在于，所述方法挑取待测菌株菌落作为PCR扩增模板，PCR扩增的条件为94℃下变性5分钟；94℃下变性30秒，58℃下退火30秒，72℃下延伸1分钟，30-35个循环；72℃延伸10分钟。

5.根据权利要求2所述的方法，其特征在于，所述方法提取待测菌株基因组DNA作为PCR扩增模板，PCR扩增的条件为94℃下变性3分钟；94℃下变性30秒，58℃下退火30秒，72℃下延伸1分钟，30-35个循环；72℃延伸10分钟。

6.根据权利要求2至5中任一项所述的方法，其特征在于，所述琼脂糖凝胶的浓度为0.8-2％(g/mL)。

7.根据权利要求2至6中任一项所述的方法，其特征在于，所述琼脂糖凝胶电泳的电压为4-6v/cm。

8.根据权利要求2至6中任一项所述的方法，其特征在于，所述水稻白叶枯病菌菌株GD414的琼脂糖凝胶电泳特异性条带出现在985bp处。

9.一种用于检测水稻白叶枯病菌菌株GD414的试剂盒，该试剂盒包含根据权利要求1所述的引物。

10.根据权利要求9所述的试剂盒，其特征在于，所述试剂盒还包括Taq酶、dNTP和10×PCR缓冲液。